论文部分内容阅读
摘 要：建立甲硝唑呋喃唑酮片含量的HPLC检测方法。采用高效液相色谱法，C18 4.6×250 mm，5 μm的色谱柱；以甲醇：水=2：8（V：V）水为流动相；检测波长为340 nm；采用外标法测定甲硝唑和呋喃唑酮的含量。甲硝唑呋喃唑酮片中甲硝唑、呋喃唑酮完全分离，浓度在考察范围内与峰面积具有良好的线性关系，R分别为0.9995、0.9998，平均回收率分别为99.7%、99.6%，精密度良好。本方法专属性强，重现性好，准确度和灵敏度高，适于甲硝唑呋喃唑酮片中甲硝唑、呋喃唑酮的含量测定。
关键词：HPLC 甲硝唑 呋喃唑酮 含量
呋喃唑酮对滴虫引起的阴道感染有治疗作用；甲硝唑有灭滴虫的作用。对厌氧微生物有杀灭作用，它在人体中还原时生成的代谢物，也具有抗厌氧菌作用，抑制细菌的脱氧核糖核酸的合成，从而干扰细菌的生长、繁殖、最终导致细菌死亡。本文建立甲硝唑呋喃唑酮复方制剂含量的测定方法，利用HPLC法测定在复方制剂中甲硝唑和呋喃唑酮的含量。实验表明该方法专属性强，重现性好，灵敏度高，且结果准确。
一、仪器和试药
Agilent1200高效液相色谱仪，Mettler XS-105DU电子天平；
乙腈、甲醇（均为Labscan，色谱纯），纯化水为公司自制新鲜纯化水，甲硝唑对照品、呋喃唑酮对照品均为中检所对照品。
二、方法与结果【1】
1.色谱条件：色谱柱：C18，4.6×250 mm，5 μm；流动相【2】：甲醇：水=2：8（V：V）；检测波长：340 nm；柱温：40℃；流速：1.0 mL/min；进样量：10 ?L
2.溶液配制（避光操作）
对照品溶液：分别精密称取甲硝唑对照品50 mg，呋喃唑酮25 mg，置同一100 mL量瓶中，加水10 mL溶解，用乙腈稀释至刻度，摇匀。再精密量取10 mL置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
供试品溶液：称取相当于甲硝唑50 mg（同时相当于呋喃唑酮25 mg）粉末，配制方法同对照品溶液制备过程。
3.系统适用性【3】：对照品溶液色谱图中甲硝唑和呋喃唑酮峰均理论板数≥2000；拖尾因子≤2.0；峰面积的RSD≤2.0%（n=6）。
表1 系统适用性实验数据
名称 第1针 第2针 第3针 第4针 第5针 第6针 平均 RSD，% 第1针理论板数 拖尾因子
甲硝唑 941532 943035 940359 940336 941551 947553 942394 0.3 17576 1.0
呋喃唑酮 653344 652632 654320 651958 653891 652337 653080 0.1 18285 1.0
4.专属性 空白溶剂、空白辅料对甲硝唑、呋喃唑酮含量的测定无干扰峰，专属性良好。
5.精密度 甲硝唑呋喃唑酮片平行制备6份供试品溶液，分别计算6份样品中甲硝唑、呋喃唑酮的含量的RSD分别为0.5%，0.2%，小于既定标准2.0%，方法精密度符合要求。
6.线性 按对照品溶液浓度的50-150%（约相当于含有甲硝唑0.025 mg/mL -0.075 mg/mL，呋喃唑酮0.0125 mg/mL-0.0375 mg/mL），分别稀释成5个不同水平浓度的溶液，分别连续进样2针，计算峰面积与浓度的函数曲线及相关系数，试验证明在上述浓度范围内线性关系良好。
回归方程与线性范围
组分、线性范围、回归方程、相关系数r依次是：
甲 硝 唑：25?g/mL-75?g/mL、Y=19050X -4960.7、0.9995；
呋喃唑酮：12.5?g/mL-37.5?g/mL、Y=25013X+6131.9、0.9998
7.准确度 制备含有甲硝唑、呋喃唑酮为规定限度的80%，100%，120%的对照品溶液+辅料，每个浓度平行制备3份，各进2针，按外标法计算溶液中含有的甲硝唑、呋喃唑酮的回收率。平均回收率应在98.0%-102.0%，RSD≤2.0%。
回收率实验数据
名称、平均回收率、RSD依次是：甲硝唑：99.7%、0.6%；呋喃唑酮：99.6%、0.6%
三、结论
通过验证中，此方法的专属性强、重现性好、准确度高，使用本方法可以始终如一的获得可靠的数据和结论。
参考文献：
[1]赵巧光、郭玉英；甲硝唑呋喃唑酮栓含量的测定[J]；黑龙江医药；2006年05期
[2]中华人民共和国药典委员会，中华人民共和国药典（2010年版）二部，北京，中国医药科技出版社，2010
[3]美国药典36版
关键词：HPLC 甲硝唑 呋喃唑酮 含量
呋喃唑酮对滴虫引起的阴道感染有治疗作用；甲硝唑有灭滴虫的作用。对厌氧微生物有杀灭作用，它在人体中还原时生成的代谢物，也具有抗厌氧菌作用，抑制细菌的脱氧核糖核酸的合成，从而干扰细菌的生长、繁殖、最终导致细菌死亡。本文建立甲硝唑呋喃唑酮复方制剂含量的测定方法，利用HPLC法测定在复方制剂中甲硝唑和呋喃唑酮的含量。实验表明该方法专属性强，重现性好，灵敏度高，且结果准确。
一、仪器和试药
Agilent1200高效液相色谱仪，Mettler XS-105DU电子天平；
乙腈、甲醇（均为Labscan，色谱纯），纯化水为公司自制新鲜纯化水，甲硝唑对照品、呋喃唑酮对照品均为中检所对照品。
二、方法与结果【1】
1.色谱条件：色谱柱：C18，4.6×250 mm，5 μm；流动相【2】：甲醇：水=2：8（V：V）；检测波长：340 nm；柱温：40℃；流速：1.0 mL/min；进样量：10 ?L
2.溶液配制（避光操作）
对照品溶液：分别精密称取甲硝唑对照品50 mg，呋喃唑酮25 mg，置同一100 mL量瓶中，加水10 mL溶解，用乙腈稀释至刻度，摇匀。再精密量取10 mL置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
供试品溶液：称取相当于甲硝唑50 mg（同时相当于呋喃唑酮25 mg）粉末，配制方法同对照品溶液制备过程。
3.系统适用性【3】：对照品溶液色谱图中甲硝唑和呋喃唑酮峰均理论板数≥2000；拖尾因子≤2.0；峰面积的RSD≤2.0%（n=6）。
表1 系统适用性实验数据
名称 第1针 第2针 第3针 第4针 第5针 第6针 平均 RSD，% 第1针理论板数 拖尾因子
甲硝唑 941532 943035 940359 940336 941551 947553 942394 0.3 17576 1.0
呋喃唑酮 653344 652632 654320 651958 653891 652337 653080 0.1 18285 1.0
4.专属性 空白溶剂、空白辅料对甲硝唑、呋喃唑酮含量的测定无干扰峰，专属性良好。
5.精密度 甲硝唑呋喃唑酮片平行制备6份供试品溶液，分别计算6份样品中甲硝唑、呋喃唑酮的含量的RSD分别为0.5%，0.2%，小于既定标准2.0%，方法精密度符合要求。
6.线性 按对照品溶液浓度的50-150%（约相当于含有甲硝唑0.025 mg/mL -0.075 mg/mL，呋喃唑酮0.0125 mg/mL-0.0375 mg/mL），分别稀释成5个不同水平浓度的溶液，分别连续进样2针，计算峰面积与浓度的函数曲线及相关系数，试验证明在上述浓度范围内线性关系良好。
回归方程与线性范围
组分、线性范围、回归方程、相关系数r依次是：
甲 硝 唑：25?g/mL-75?g/mL、Y=19050X -4960.7、0.9995；
呋喃唑酮：12.5?g/mL-37.5?g/mL、Y=25013X+6131.9、0.9998
7.准确度 制备含有甲硝唑、呋喃唑酮为规定限度的80%，100%，120%的对照品溶液+辅料，每个浓度平行制备3份，各进2针，按外标法计算溶液中含有的甲硝唑、呋喃唑酮的回收率。平均回收率应在98.0%-102.0%，RSD≤2.0%。
回收率实验数据
名称、平均回收率、RSD依次是：甲硝唑：99.7%、0.6%；呋喃唑酮：99.6%、0.6%
三、结论
通过验证中，此方法的专属性强、重现性好、准确度高，使用本方法可以始终如一的获得可靠的数据和结论。
参考文献：
[1]赵巧光、郭玉英；甲硝唑呋喃唑酮栓含量的测定[J]；黑龙江医药；2006年05期
[2]中华人民共和国药典委员会，中华人民共和国药典（2010年版）二部，北京，中国医药科技出版社，2010
[3]美国药典36版