【摘 要】
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目的:构建高表达CXCR4慢病毒并转染MCF-7细胞,获得高表达CXCR4的MCF-7细胞。方法:RT—PCR法扩增CXCR4基因,构建重组质粒CXCR4/pSin-EF2,与psPAX2、pMD2G质粒共转染HEK293T细胞包装
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系广东省热带病研究重点实验室,第一临床医学院,温州医科大学中美糖尿病并发症研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(编号:81101732),科技部重大新药创制计划项目(编号:2012ZX09103-301-016),广东省科技计划项目(编号:20138021800040),广东省大学生创新创业训练计划项目(编号:201412121106),广州市珠江科技新星专项基金项目(编号:2013J2200047)
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目的:构建高表达CXCR4慢病毒并转染MCF-7细胞,获得高表达CXCR4的MCF-7细胞。方法:RT—PCR法扩增CXCR4基因,构建重组质粒CXCR4/pSin-EF2,与psPAX2、pMD2G质粒共转染HEK293T细胞包装慢病毒,以空我体包装的病毒为对照,将包装慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7。RT—PCR和Westemblot检测转染前后CXCR4基因和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞表面CXCR4受体表达。结果:双酶切和测序结果证实重组质粒CXCR4/pSin.EF2构建成功,转染HEK293
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