【摘 要】
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目的 探讨异甘草素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)Ⅰ型(Col-Ⅰ)和Ⅲ型(Col-Ⅲ)胶原合成的影响及机制.方法 体外培养KF细胞,异甘草素作用于KF细胞24 h后,蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和母亲DPP同源物7(Smad7)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-181a-5p和Smad7 mRNA的表达水平.分别转染miR-181a-5p抑制剂和Smad7过表达载体至KF细胞,Western blot检测下调miR-181a-
【机 构】
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110003,沈阳市第七人民医院皮肤科
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目的 探讨异甘草素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)Ⅰ型(Col-Ⅰ)和Ⅲ型(Col-Ⅲ)胶原合成的影响及机制.方法 体外培养KF细胞,异甘草素作用于KF细胞24 h后,蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和母亲DPP同源物7(Smad7)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-181a-5p和Smad7 mRNA的表达水平.分别转染miR-181a-5p抑制剂和Smad7过表达载体至KF细胞,Western blot检测下调miR-181a-5p或上调Smad7对异甘草素作用的KF细胞中Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a-5p与Smad7的调控关系.结果 异甘草素作用于KF细胞后,细胞中Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达水平降低(P<0.05),miR-181a-5p表达水平降低(P<0.05),Smad7的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).下调miR-181a-5p或上调Smad7后,KF细胞中Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达水平降低(P<0.05).miR-181a-5p在KF细胞中负调控Smad7表达.上调miR-181a-5p表达后,异甘草素干预的KF细胞中Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 异甘草素可抑制KF细胞Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原的合成,其机制可能与下调miR-181a-5p进而上调Smad7表达有关.
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