【摘 要】
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通过接合使供体大肠杆菌DH5α中的质粒pSC123上的转座子插入到受体菌CFDS-1基因组DNA中,以引起该菌株的基因插入突变.利用转座子上的卡那霉素抗性基因和呋喃丹降解过程中红色
【机 构】
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南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室
【基金项目】
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中国科学院资助项目，国家重点基础研究发展计划(973计划)，江苏省教育厅科研项目
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通过接合使供体大肠杆菌DH5α中的质粒pSC123上的转座子插入到受体菌CFDS-1基因组DNA中,以引起该菌株的基因插入突变.利用转座子上的卡那霉素抗性基因和呋喃丹降解过程中红色物质的产生与否初步筛选出6株突变株,分别命名为CFDS-M1～CFDS-M6.紫外扫描和气谱检测结果进一步证明这些突变子确实失去了对呋喃丹的降解能力.根据转座子的序列设计引物,以6株突变株的基因组DNA为模板进行PCR扩增,并对PCR产物进行限制性酶切分析,结果表明这些突变子中呋喃丹降解基因的失活就是由于转座子的插入而导致的.
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