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探讨EV71对人恶性胶质瘤细胞株U251的生长、凋亡和人端粒酶反转录酶(hTERT)表达的影响。
方法采用RPMI 1640培养U251细胞,培养24 h后随机分为实验组和对照组,实验组按感染复数值为1加入EV71,并共培养72 h,对照组不加EV71。加入EV71后0 h、24 h、48 h和72 h用倒置显微镜观察U251细胞形态和生长情况,流式细胞仪测定U251凋亡率,半定量RT-PCR检测hTERT的相对表达水平。
结果倒置显微镜观察发现,与对照组比较,实验组加入EV71后24 h,U251细胞生长明显受到抑制,48 h和72 h时U251细胞明显皱缩、变小、形态不规则,而对照组细胞则大小均匀。流式细胞仪检测发现,实验组加入EV71后24 h、48 h和72 h,U251细胞的凋亡率均明显高于对照组[24 h:(12.55±2.38)%比(1.42±0.21)%,48 h:(65.60±8.48)%比(1.42±0.17)%,72 h:(87.52±3.05)%比(1.41±0.16)%,P均=0.000],且细胞凋亡率逐日升高,对照组细胞凋亡率无明显变化。实验组加入EV71后24 h、48 h和72 h,U251细胞的hTERT相对表达水平均明显低于对照组[24 h:(0.58±0.05)比(0.89±0.05),48 h:(0.23±0.04)比(0.89±0.03),72 h:(0.10±0.03)比(0.90±0.06),P均=0.000],且表达水平逐日下降,对照组表达水平无明显变化。
结论EV71能有效抑制U251细胞的生长,诱导细胞凋亡,具有潜在的抗瘤作用,其作用机制可能部分与下调U251细胞的hTERT表达有关。