microRNA-34a靶向抑制Notch-1基因对膀胱癌J82细胞增殖和迁移的影响

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目的 探讨microRN A-34a( miR-34a)通过靶向抑制Notch-1基因表达对人膀胱癌J82细胞增殖和迁移的影响. 方法 查询基因组数据库,应用基因预测软件进行生物信息学分析,预测miR-34a可能靶向调控Notch1基因;实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法分别检测16例浸润性膀胱癌组织及质粒转染的膀胱癌J82细胞的miR-34a和Notch1表达情况;萤光素酶实验检测miR34a与Notch1基因的结合位点;将miR-34a表达质粒转染J82细胞,新型四唑氮盐化合物比色法和迁移实验评估miR-34a对细胞增殖和迁移的影响. 结果 浸润性膀胱癌组织miR-34a的表达中位数为0.016,四分位数间距0.018;Notch1基因表达中位数为2.765,四分位数间距2.156;癌旁组织miR34a表达中位数为0.042,四分位数间距0.059;Notch1基因表达中位数为2.312,四分位数间距1.365,组间差异均有统计学意义(P<0.01);浸润性膀胱癌组织的Notch1蛋白表达量为0.857±0.197,癌旁组织为0.648 ±0.171,组间差异有统计学意义(P<0.01).质粒转染J82细胞,miR-34a表达质粒组miR-34a的表达量为(2.408±0.789)×10-4,对照质粒组为(0.153±0.029)×10-4(P=0.0026);miR-34a表达质粒组Notch1基因表达量为3.001±0.106,对照组为4.998±1.053 (P=0.0308);miR-34a表达质粒组Notch1蛋白表达量为0.747±0.050,对照组为0.988±0.102(P=0.0215);miR-34a表达质粒组细胞萤光素酶活性为0.422±0.028,对照组为2.392±0.148(P<0.0001),组间差异均有统计学意义;miR-34a表达质粒组细胞增殖受到抑制,细胞迁移数量为179.3±21.02,对照组为269.7±23.71,组间差异有统计学意义(P=0.0078). 结论 miR-34a可与Notch1基因的3’非翻译区(3UTR)结合靶向抑制Notch1基因表达,进而抑制了膀胱癌J82细胞的增殖和迁移.
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