【摘 要】
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提取黄牛血液基因组DNA,PCR扩增α干扰素基因,重组到pET32a+表达载体中.测序结果表明,扩增片段含有498 bp的ORF,可编码166个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的牛α干扰素C亚型氨基
【机 构】
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山东省农业科学院奶牛研究中心,东北农业大学生命科学学院
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提取黄牛血液基因组DNA,PCR扩增α干扰素基因,重组到pET32a+表达载体中.测序结果表明,扩增片段含有498 bp的ORF,可编码166个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的牛α干扰素C亚型氨基酸组成同源性为97.6%.构建原核表达载体pET32a+/BoIFN-α,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为40 ku,表达量占菌体总蛋白的26.7%.结果从鲁西黄牛中克隆了IFN-α基因的一种新亚型,即BoIFN-α C2,构建原核表达质粒,并实现了高效表达,为重组牛干扰素的开发奠定了基础.
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