【摘 要】
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目的克隆人细小病毒B19 VP1基因片段,构建其重组克隆载体和表达载体,并诱导表达.方法利用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,将B19病毒VP1基因片段扩增后,构建pGEM-T-easy克隆
【机 构】
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郑州大学一附院,郑州大学基础医学院,郑州消防支队卫生队
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目的克隆人细小病毒B19 VP1基因片段,构建其重组克隆载体和表达载体,并诱导表达.方法利用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,将B19病毒VP1基因片段扩增后,构建pGEM-T-easy克隆载体;经PCR筛选后,亚克隆于pGEX-4T-1表达载体中,并转化至BL21感受态菌;经诱导剂异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并以免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定.结果扩增出一条约801bp的基因片段,PCR鉴定结果的与预期结果一致.经IPTG诱导,VP1融合蛋白在大肠杆菌中得到成功表达,PAGE上出
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