【摘 要】
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毕赤酵母(Komagataella phaffii,原名Pichia pastoris)是一种甲基型营养酵母,其表达系统是当前最重要的外源蛋白表达系统之一.重组毕赤酵母表达外源蛋白的过程研究通常采用细胞群体分析,获得大量细胞的平均化结果,但无法区分不同细胞个体的性能差异性.本研究以表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组毕赤酵母GS115-gfp为材料,海藻酸钠为壁材,通过内源乳化法将毕赤酵母GS115-gfp包埋进海藻酸钠微胶囊中,对微胶囊内的毕赤酵母GS115-gfp进行诱导表达.结果表明在钙离子与海藻酸钠摩
【机 构】
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上海理工大学医疗器械与食品学院食品科学与工程研究所,上海200093
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毕赤酵母(Komagataella phaffii,原名Pichia pastoris)是一种甲基型营养酵母,其表达系统是当前最重要的外源蛋白表达系统之一.重组毕赤酵母表达外源蛋白的过程研究通常采用细胞群体分析,获得大量细胞的平均化结果,但无法区分不同细胞个体的性能差异性.本研究以表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组毕赤酵母GS115-gfp为材料,海藻酸钠为壁材,通过内源乳化法将毕赤酵母GS115-gfp包埋进海藻酸钠微胶囊中,对微胶囊内的毕赤酵母GS115-gfp进行诱导表达.结果表明在钙离子与海藻酸钠摩尔质量比为1:3,乙酸与海藻酸钠的摩尔质量比为1:3,Span 80添加量为1.5％,水相与油相比为0.4665,转速为500 r/min的条件下制备所得微胶囊的粒径最小(93.03μm),此时包埋率为80.01％.利用甲醇诱导所制备的毕赤酵母微胶囊,可以表达GFP.本研究为高效表达外源蛋白的重组毕赤酵母筛选奠定了基础.
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