【摘 要】
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目的 探讨金雀异黄酮(GEN)对大鼠视网膜缺血-再灌注(L/R)损伤的保护作用.方法 选取30只健康SPF级大鼠,按照随机数字表法将其分为假手术组、I/R组和L/R+ GEN组,每组各10只.I/R组和I/R+ GEN组大鼠采用前房灌注生理盐水升高眼压法制备视网膜I/R损伤大鼠模型,I/R组大鼠术后每天给予注射生理盐水(1 mL·kg-1·d-1);I/R+ GEN组大鼠术后每天给予注射GEN (40 mL·kg-1·d-1);假手术组大鼠行相应假手术后每天予以注射生理盐水(1 mL·kg-1·d-1),
【机 构】
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637000 四川省南充市,川北医学院第二附属医院眼科
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目的 探讨金雀异黄酮(GEN)对大鼠视网膜缺血-再灌注(L/R)损伤的保护作用.方法 选取30只健康SPF级大鼠,按照随机数字表法将其分为假手术组、I/R组和L/R+ GEN组,每组各10只.I/R组和I/R+ GEN组大鼠采用前房灌注生理盐水升高眼压法制备视网膜I/R损伤大鼠模型,I/R组大鼠术后每天给予注射生理盐水(1 mL·kg-1·d-1);I/R+ GEN组大鼠术后每天给予注射GEN (40 mL·kg-1·d-1);假手术组大鼠行相应假手术后每天予以注射生理盐水(1 mL·kg-1·d-1),连续7d后,颈椎脱臼法处死各组大鼠,取眼部组织.HE染色观察各组大鼠视网膜的形态以及内丛状层(IPL)、内核层(INL)和神经节细胞层(GCL)厚度;免疫荧光分析观察各组大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的存活率;TUNEL染色检测各组大鼠视网膜细胞凋亡水平;检测各组大鼠视网膜组织中过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平以反映视网膜氧化应激状态;Western blot分析三组大鼠视网膜中NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达.结果 I/R组、I/R+ GEN组和假手术组大鼠视网膜总厚度分别为(114.37±7.32) μm、(155.31±6.83) μm和(178.98±13.65) μm(t=14.284,P＜0.01),I/R组低于假手术组和I/R+GEN组,差异均有统计学意义(均为P＜0.01).I/R组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为(18.95±5.06) μm、(17.62±4.69)μm和(19.03±4.74) μm,I/R+ GEN组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为(20.69±8.13) μm、(25.74±6.78) μm和(26.71±7.85) μm,假手术组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为(11.73±3.15) μm、(11.97±3.56) μm和(12.59±3.24)μm(均为P＜0.05),I/R组与假手术组和I/R+ GEN组三个指标比较差异均有统计学意义(均为P＜0.01).I/R组、I/R+ GEN组和假手术组大鼠视网膜中RGC相对存活率分别为(26.87±3.12)％、(73.46±7.80)％和(100.00±5.64)％(t=16.825,P＜0.01),I/R组RGC相对存活率低于假手术组和I/R+ GEN组,差异均有统计学意义(均为P＜0.01).I/R组、I/R+ GEN组和假手术组大鼠视网膜中CAT、MDA、SOD含量总体比较差异均有统计学意义(均为P＜0.01),I/R组与I/R+ GEN组和假手术组三个指标比较差异均有统计学意义(均为P＜0.05).Western blot检测结果显示,三组大鼠视网膜中NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达总体比较差异均有统计学意义(均为P＜0.01),组间两两比较差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 GEN可通过提高视网膜细胞抗炎和抗氧化能力抑制视网膜细胞凋亡,从而起到对大鼠视网膜I/R损伤的保护作用.
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