兔抗人ERA抗血清的制备

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yujiankaka
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[张俊杰,吴元明,刘慧萍,纪宗玲,陈南春,陈苏民.细胞与分子免疫学杂志,2001;17(1):73-75]目的 在大肠杆菌中表达人ERA蛋白(h-ERA)和h-ERAC端结构域蛋白,并制备兔抗h-ERA抗血清.方法 以PCR扩增人era基因(h-era)全长cDNA和h-ERAC端的结构域基因,并分别克隆到(His)6融合表达载体pRSET-C和非融合表达载体pDH中,诱导表达(His)6-h-ERA融合蛋白和h-ERAC端结构域蛋白.用h-ERAC端结构域蛋白免疫兔,制备兔抗h-ERA抗血清,并以Western-blot对兔抗h-ERA抗血清进行鉴定.结果 大肠杆菌中表达的h-ERAC端结构域蛋白和(His)6-h-ERA融合蛋白,分别占菌体总蛋白40%和80%。用兔抗血清可检出大肠杆菌中表达的(His)6-h-ERA融合蛋白.结论 h-ERA和h-ERAC端结构域蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,并成功地制备了兔抗h-ERA抗血清.
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