【摘 要】
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目的研究日本血吸虫中国大陆株23 kDa膜蛋白(SjC23)DNA疫苗诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用.方法将全长的SjC23基因克隆到真核表达载体pcDNA3 1,构建DNA疫苗pcDNA3.1-SjC23.制备
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目的研究日本血吸虫中国大陆株23 kDa膜蛋白(SjC23)DNA疫苗诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用.方法将全长的SjC23基因克隆到真核表达载体pcDNA3 1,构建DNA疫苗pcDNA3.1-SjC23.制备SjC23及IL-12的两个亚单位p35、p40的DNA疫苗和对照pcDNA3.1.48只C57BL/6小鼠随机分为A、B、C 3组.A组小鼠肌注100μgpcDNA3.1;B组注射100μgpcDNA3.1-SjC23;C组肌注pcDNA3.1-SjC23、pcDNA3.1-p35及pcD-NA3.1-p40各100μg的混合物.每隔2周各免疫1次,共3次.第8周每鼠感染45±2条/只尾蚴,45 d后剖杀,计数成虫及肝内虫卵.采用免疫组化法检测SjC23及p35、p40在小鼠局部组织内的表达;用脾细胞培养法检测经rSjC23-HD刺激后,攻击前、后小鼠脾细胞IL-2、IL-4、IL10和IFN-γ的水平.用Western blotting检测血清中抗SjC23抗体.结果 SjC23以及p35、p40在免疫小鼠股四头肌细胞膜和细胞浆均获得表达.IL-2和IFN-γ的水平攻击前、后在B组和C组均明显升高.Western blotting检测抗SjC23抗体结果表明,免疫后两周,B组8/10份血清为阳性,C组9/10份血清阳性.B组和C组分别获得26.9%和35.4%的减虫率,C组显著高于B组(P
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