腺病毒介导重组hKGF基因转染HaCat细胞及其表达

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jakynum1

【摘要】

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将PCR扩增得到的人角质细胞生长因子（hKGF）基因片段插入穿梭载体pAdTrack-CMV，产生重组质粒pAdTrack-CMV-hKGF，经Pme Ⅰ线性化后，通过电转法导入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠

【作者】

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吴晓萍曾耀英贺芳

【机构】

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暨南大学组织移植与免疫实验中心

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

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人角质细胞生长因子腺病毒同源重组分泌表达

【基金项目】

：

国家“863”计划资助项目(2002AA2Z3318,2004AA2Z3C60);国家自然科学基金重点资助项目(303230350)

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将PCR扩增得到的人角质细胞生长因子（hKGF）基因片段插入穿梭载体pAdTrack-CMV，产生重组质粒pAdTrack-CMV-hKGF，经Pme Ⅰ线性化后，通过电转法导入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183进行同源重组，得到重组腺病毒质粒pAdEasy-hKGF。采用Lipofectamine2000将pAdEasy-hKGF转染到HEK-293细胞，在HEK-293细胞中包装并扩增出大量的腺病毒，经PCR鉴定含有hKGF基因。获得的重组hKGF腺病毒感染颗粒可高效感染HaCa

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