运用生色基因标记黄瓜根围促生菌(PGPR)筛选菌株*

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采用三亲交配方法,通过Tn7转座系统将lacZY标记基因导入黄瓜根围促生菌(PGPR)筛选菌株Pseudomonas fluorescens CN116和Pseudomonas corrugata CN31的利福平抗性突变株中;标记假单胞菌菌株则被赋予了利用乳糖作为唯一碳源的能力,在只有乳糖的M9培养基上生长能分解X-Gal,菌落显出特有的蓝色;经Southern杂交分析,证明标记基因lacZY存在于转化菌株的染色体上;经验证标记菌株标记性状稳定,与对应的野生菌株比较其它性状如培养性状、形态特征、生防效果等基本不变;PGPR菌株利福平抗性和生色基因标记的结合(双标记)能最大限度地将土壤中引入的PGPR菌株与土著细菌分开,检测下限可达10 CFU/mL,为PGPR在根围的分子生态学研究提供了一个较好的工具.
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