鼻咽癌斑马鱼移植瘤模型的构建及姜黄素对CNE-2细胞的抑制作用

来源 :吉林大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:chchang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立人鼻咽癌斑马鱼异种移植瘤模型,探讨姜黄素在体内外对鼻咽癌的抑制作用,为阐明姜黄素抗鼻咽癌的分子机制提供依据.方法:将鼻咽癌CNE-2细胞分为对照组和细胞膜红色荧光染色剂CM-Dil(CM-Dil)组,连续5 d进行细胞计数,并观察荧光强度变化.采用显微注射法构建鼻咽癌斑马鱼异种移植瘤模型,将斑马鱼胚胎分为对照组、PBS组和模型组,对照组斑马鱼胚胎不予处理,PBS组斑马鱼胚胎注射10 nL PBS缓冲液,模型组斑马鱼胚胎注射10 nL CNE-2细胞悬液,孵育培养后统计各组斑马鱼存活数,采用宏观体式显微镜观察并定量分析模型组斑马鱼体内移植瘤荧光强度,HE染色观察对照组和模型组斑马鱼移植瘤组织形态表现.将受精后天数(dpf)为3的斑马鱼胚胎暴露于含不同浓度(0、0.625、1.250、2.500、5.000、7.500和10.000μmol·L-1)姜黄素的饲养水中,观察斑马鱼死亡数和畸形数并计算斑马鱼死亡率,筛选姜黄素体内用药浓度.采用0、0.625、1.250、2.500和5.000μmol·L-1姜黄素作用于斑马鱼鼻咽癌模型48 h,检测移植瘤生长和转移情况.0、10和20μmol·L-1姜黄素作用CNE-2细胞24 h,CCK-8法和划痕实验检测细胞增殖率和迁移率.结果:与对照组比较,CM-Dil组CNE-2细胞数差异无统计学意义(P>0.05).实验第5天,与对照组比较,PBS组斑马鱼存活数差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和PBS组比较,模型组斑马鱼存活数明显减少(P<0.01).模型组斑马鱼体内红色荧光随着时间的延长而增强;与注射后第1天比较,注射后第5天模型组斑马鱼体内红色荧光强度明显增强(P<0.05).HE染色,模型组斑马鱼切片中的卵黄囊有CNE-2细胞,提示造模成功.浓度小于或等于5.000μmol·L-1姜黄素组斑马鱼无死亡及明显毒性反应.与对照组(0μmol·L-1姜黄素组)比较,2.500和5.000μmol·L-1姜黄素组斑马鱼体内移植瘤荧光强度明显降低(P<0.05或P<0.01),5.000μmol·L-1姜黄素组发生头尾部转移的斑马鱼数量明显减少(P<0.05).CCK-8法检测和划痕实验,与对照组(0μmol·L-1姜黄素组)比较,10和20μmol·L-1姜黄素组CNE-2细胞增殖率和迁移率明显降低(P<0.05).结论:人鼻咽癌CNE-2细胞可以成功植入斑马鱼体内并构建鼻咽癌斑马鱼模型,姜黄素在体内外均能抑制鼻咽癌细胞的增殖和转移,具有良好的抗肿瘤前景.
其他文献
目的:比较手术室内和滑雪场雪道条件下,气管插管和喉罩置入的完成时间,探讨滑雪场雪道条件下人工气道建立的优选方法.方法:在滑雪场雪道上,以头下脚上位放置模拟人,由一名麻醉医生穿戴全套的滑雪服、头盔、雪镜、手套以及滑雪鞋,分别采用可视喉镜辅助下气管插管(气管插管组)和喉罩置入(喉罩组)的方法为模拟人建立人工气道,每种方法重复5次,记录人工气道建立的时间.在医院手术间内,将模拟人平放于手术床上,由同一名麻醉医生采用相同的方法完成人工气道建立,重复5次并记录时间.比较手术室内气管插管及喉罩置入的时间与滑雪场雪道完
目的:探讨人参组培不定根蛋白(GARP)对小鼠的抗疲劳作用,阐明其作用机制,为开发利用人参组培不定根资源提供实验依据.方法:40只昆明种清洁级小鼠采用负重游泳实验建立疲劳动物模型,随机分为对照组,低、中和高剂量(0.25、0.50和1.00 g·kg-1)GARP组,每组10只.通过力竭游泳实验记录各组小鼠游泳时间,游泳实验后处死小鼠,采用分光光度法检测各组小鼠血清中血乳酸(BLA)和血尿素氮(BUN)水平,采用分光光度法检测各组小鼠肝组织中谷胱甘肽(GSH)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和肝糖原水平
目 的:总结和对比去分支杂交手术和传统手术治疗胸腹主动脉瘤的近远期结果.方法:回顾性分析2008年1月至2019年12月采用传统手术治疗胸腹主动脉瘤的18例患者和采用杂交手术治疗的11例患者的临床资料.杂交手术组中,夹层动脉瘤、术前合并肾功能不全以及美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)评分≥3分的患者比例明显高于传统手术组.结果:去分支杂交手术患者的手术时间为(445±85)min,术中出血量为(955±599)mL,术后30 d1发生并发