TaqMan-MGB探针实时PCR用于Duffy血型基因分型的研究

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目的应用Taq Man-MGB探针实时PCR技术,建立1个Duffy血型基因分型的新方法,了解大连地区汉族人群Duffy血型等位基因频率分布特征。方法设计并合成Taq Man-MGB探针实时PCR的引物和探针,应用TaqMan-MGB探针实时PCR对120例健康献血者的Duffy血型进行基因分型,对其重复性和最低检出限进行评价。并将该法和传统的等位基因特异性引物PCR(PCR-ASP)方法进行比较。结果 Taq Man-MGB探针实时PCR方法和PCR-ASP法对Duffy血型的基因分型结果是完全一致的。Taq Man-MGB探针实时PCR再次分型结果和初次基因分型的结果是完全一致的。Taq Man-MGB探针实时PCR的最低检测限是100 pg。大连汉族人群Duffy血型FY*A基因频率为93.3%,FY*B的基因频率为6.7%,其基因分布特点和国内其他地区汉族人群相似,无显著性差异(P>0.05),但与浙江畲族相比,有显著性差异(P<0.05)。Fya和Fyb抗原不配合几率为0.116 7。结论应用Taq ManMGB探针实时PCR技术建立的Duffy血型基因分型方法具有快速、简单、准确、灵敏、重复性好、通量高等特点,优于传统的PCR-ASP法。
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