农杆菌介导的烟草高效遗传转化体系研究

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通过对农杆菌介导的烟草遗传转化方法进行优化,建立了一种快速高效的烟草叶盘遗传转化体系.用OD600为0.5的农杆菌悬浮液侵染大小约1 cm×1 cm烟草叶盘6~9 min,然后置于以MS为基本培养基附加2.25mg/L 6-BA和0.3 mg/INAA的分化培养基上,在100mg/I卡那霉素选择压下,21~28 d可获得抗性不定芽.通过卡那霉素生根筛选和PCR扩增鉴定,其阳性转基因植株频率可达57.1%.
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