【摘 要】
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为构建从江香猪源干扰素γ(IFNγ)植物表达载体,通过农杆菌真空渗透法在新鲜生菜中实现瞬时表达。参考GenBank登录的猪IFNγ基因序列设计1对特异性IFNγ引物,采用RT-PCR方法
【机 构】
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贵州大学动物科学学院预防兽医实验室,贵州省动物生物制品工程技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31460668);贵州省科学技术基金(黔科合J字[2015]2046号);贵州省高层次创新型人才培养(黔财教[2017]号);贵州大学博士基金(贵大人基合字(2013)12号);贵州省研究生工作站计划项目([GZZ2017002]);贵州省科技平台及人才团队计划(黔科合平台人才[2018]5253)
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为构建从江香猪源干扰素γ(IFNγ)植物表达载体,通过农杆菌真空渗透法在新鲜生菜中实现瞬时表达。参考GenBank登录的猪IFNγ基因序列设计1对特异性IFNγ引物,采用RT-PCR方法从贵州从江香猪源肝脏组织扩增IFNγ基因序列,将其克隆至植物表达载体PBI121,转化根癌农杆菌LBA4404,筛选阳性菌株提取质粒,对重组质粒进行PCR扩增、双酶切及测序鉴定;携带重组质粒根癌农杆菌真空渗透法感染生菜,GUS染色检测感染的生菜叶片,ELISA检测感染生菜叶片中从江香猪源IFNγ蛋白,分析重组质粒在生菜中表
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