【摘 要】
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长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一类长度大于200nt、没有长开放阅读框架但往往具有m RNA结构特征的RNA,可以在转录及转录后水平参与基因的表达调控。近年来,
【机 构】
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四川农业大学,四川农业大学动物科技学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(编号:31522055和31772576);四川省青年科技创新研究团队项目(编号:2015TD0012)资助~~
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长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一类长度大于200nt、没有长开放阅读框架但往往具有m RNA结构特征的RNA,可以在转录及转录后水平参与基因的表达调控。近年来,有研究证实lnc RNA对脂肪生成具有重要作用。Lnc-RAP3位于小鼠(Mus musculus)17号染色体,其表达量在小鼠脂肪细胞分化前后呈现显著差异,但其具体的生物学功能尚不清楚。为探讨lnc-RAP3在小鼠3T3-L1前脂肪细胞成脂分化中的作用,本文首先构建了lnc-RAP3的真核表达载体pc DNA3.1-RAP3,利用脂质体将pc DNA3.1-RAP3和人工合成的lnc-RAP3的si RNAs分别转染3T3-L1前脂肪细胞,并对转染后的细胞进行诱导分化,并通过油红O染色、q RT-PCR检测成脂分化相关基因表达等方法比较过表达和敲降lnc-RAP3对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响。结果显示,过表达lnc-RAP3后,细胞内脂滴聚集显著减少(P<0.05),在诱导分化第0 d、2 d和4 d时C/EBPα、Glut4、PPARγ、LPL和FAS的表达水平均呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降;敲降lnc-RAP3后,细胞内脂滴聚集显著增多(P<0.05),同时在诱导分化第0 d、2 d时PPARγ、LPL、C/EBPα、FAS和Glut4的表达水平呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高。本研究结果表明,lnc-RAP3可能通过影响成脂分化相关基因的表达来抑制3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化。
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