【摘 要】
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目的分析MAGEA6在胃癌中表达的临床意义及其对胃癌细胞生物学作用的影响。方法 收集2009年12月-2010年6月医院样本库中经手术切除的90例胃癌组织芯片样本,利用免疫组化检测胃癌组织芯片中MAGEA6的表达情况,分析MAGEA6表达与胃癌临床病理特征的关系,Kaplan-Meier在线分析MAGEA6表达与胃癌预后的关系。体外培养BGC-823胃癌细胞系,设置si-MAGEA6组(转染si-
【基金项目】
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广东省医学科学技术研究基金(A2019195);
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目的分析MAGEA6在胃癌中表达的临床意义及其对胃癌细胞生物学作用的影响。方法 收集2009年12月-2010年6月医院样本库中经手术切除的90例胃癌组织芯片样本,利用免疫组化检测胃癌组织芯片中MAGEA6的表达情况,分析MAGEA6表达与胃癌临床病理特征的关系,Kaplan-Meier在线分析MAGEA6表达与胃癌预后的关系。体外培养BGC-823胃癌细胞系,设置si-MAGEA6组(转染si-MAGEA6)与si-Ctrl组(转染空载对照)。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblotting检测MAGEA6、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)、p62蛋白(p62)、自噬相关基因5(Atg-5)、酵母ATG6同源物(Beclin1)]、Akt/mTOR信号通路相关蛋白[蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)]的表达,扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察自噬小体形成情况和自噬流变化。结果 MAGEA6在胃癌组织中的免疫组化评分高于癌旁组织[(3.77±1.50)分 vs.(2.58±1.11)分,P<0.05]。MAGEA6高表达与年龄、TNM分期有关(P<0.05)。si-MAGEA6组胃癌细胞活力低于si-Ctrl组(P<0.05),细胞凋亡率高于si-Ctrl组(14.97%±0.86% vs.4.63%±0.55%,P<0.05)。si-MAGEA6组MAGEA6、Bcl-2、p62、p-Akt和p-mTOR表达水平低于si-Ctrl组,BAX、Atg-5、Beclin1表达水平以及LC3-I/LC3-Ⅱ高于si-Ctrl组(P<0.05)。si-MAGEA6组胃癌细胞胞质内自噬小体明显增多,且自噬小体与溶酶体形成自噬溶酶体。结论MAGEA6在胃癌组织中高表达,沉默MAGEA6的表达可抑制胃癌细胞增殖,提示MAGEA6可能是胃癌的有效生物标志物和潜在的治疗靶点。
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