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目的 建立高表达抗人TNF—α人-鼠嵌合抗体的工程细胞株。方法 将构建的抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体基因真核表达载体转染CHO细胞,并采用DHFR/MTX基因扩增策略,经反复加压和克隆筛选,提高抗体的表达量。用ELISA、Western blot和体外中和试验分析比较抗人TNF—α人-鼠嵌合抗体与鼠亲本单抗的特性。结果 获得的表达抗人TNF-α嵌合抗体的转染细胞系2F5,在静止培养4d后工程抗体的表达量约80mg/L。所表达的工程抗体优于鼠亲本单抗F7/2,并具有良好的特异性和中和活性,其相对亲和力约为2