建立一个能够对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)卵子受精失败进行早期判断进而实施早期补救性人工激活的技术体系,并探讨其激活效率及应用价值。
方法首先回顾性分析2017年1月至2018年3月期间广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心150个采用时差胚胎动态监测系统(Time-lapse)系统培养的ICSI周期第二极体(Pb2)释放时间分布及其与受精及胚胎发育结局的关系,探讨Pb2释放作为ICSI受精失败早期判断指标的可行性。其次采用随机对照试验,收集2018年3月至2019年6月期间93个ICSI助孕周期的225个受精失败卵子,根据人工激活方式不同分为未激活组(NAOA组)、早期激活组(RAOA组)、晚期激活组(LAOA组),同时将其余ICSI注射卵子作为对照组,比较4组受精及胚胎发育参数,探讨ICSI受精失败早期补救性人工激活的效率和应用价值。
结果Time-lapse监测ICSI注射后卵子有Pb2释放组的受精率(99.91%)、双原核(2PN)受精率(97.76%)显著高于无Pb2释放组(0.03%、0.00%)且差异均具有统计学意义(P均<0.001);ICSI注射后卵子Pb2释放时间为(3.04±1.45) h,Pb2释放时间分布及占比分别为0~3 h(58.58%)、3~5 h(36.29%)、5~8 h(3.92%)、>8 h(1.21%);NAOA组Pb2释放率、受精率、2PN受精率均为0%,LAOA组2PN受精率(36.00%)、第3日(D3)优质胚胎率(8.00%)、第5日(D5)囊胚转化率(0%)、D5优质囊胚转化率(0%)均显著低于RAOA组(60.00%、44.19%、51.16%、25.58%)且差异均有统计学意义(P=0.005,P=0.002,P<0.001,P=0.005),同时均显著低于对照组(97.63%、48.62%、63.23%、37.94%)且差异均有统计学意义(P均<0.001);RAOA组Pb2释放率(84.00%)、受精率(81.33%)、2PN受精率(60.00%)、2PN卵裂率(95.56%)均显著低于对照组(100.00%、99.68%、97.63%、99.51%)且差异均具有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P=0.04),但D3优质胚胎率、D5囊胚转化率、D5优质囊胚转化率2组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。
结论Time-lapse监测Pb2释放可以作为早期判断ICSI卵子受精失败的指标,在ICSI注射后5 h对受精失败卵子进行早期补救性人工激活可以获得正常受精和理想的胚胎发育结局。