【摘 要】
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目的建立流感疫苗神经氨酸酶分离纯化方法，并制备神经氨酸酶定量检测参考品。方法制备对神经氨酸酶具有特异亲和力的功能化磁粒，建立基于该磁粒分离纯化神经氨酸酶的方法，优化分离纯化条件，对分离纯化的神经氨酸酶进行纯度分析和特异性验证，并进行酶活性测定和蛋白质定量。结果成功制备4-氨基苯草氨酸修饰的功能磁粒，建立基于该磁粒分离纯化神经氨酸酶方法，分离纯化神经氨酸酶纯度为98.7%，从H1N1、H3N2、B/Victoria和B/Yamagate4种疫苗单价原液分离纯化的神经氨酸酶蛋白质浓度分别为71.50、100.
【机 构】
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武汉生物制品研究所病毒性疫苗研究二室 430207;国家联合疫苗工程技术研究中心，武汉 430207武汉生物制品研究所病毒性疫苗研究二室 430207;国家联合疫苗工程技术研究中心，武汉 430207
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目的建立流感疫苗神经氨酸酶分离纯化方法，并制备神经氨酸酶定量检测参考品。
方法制备对神经氨酸酶具有特异亲和力的功能化磁粒，建立基于该磁粒分离纯化神经氨酸酶的方法，优化分离纯化条件，对分离纯化的神经氨酸酶进行纯度分析和特异性验证，并进行酶活性测定和蛋白质定量。
结果成功制备4-氨基苯草氨酸修饰的功能磁粒，建立基于该磁粒分离纯化神经氨酸酶方法，分离纯化神经氨酸酶纯度为98.7%，从H1N1、H3N2、B/Victoria和B/Yamagate 4种疫苗单价原液分离纯化的神经氨酸酶蛋白质浓度分别为71.50、100.58、64.11和37.68 μg/ml，且均保留酶活性。
结论建立了分离纯化流感病毒神经氨酸酶方法并制备了相应参考品。
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