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【目的】研究建立凤丹牡丹离体快繁技术体系，为油用牡丹优良单株无性快繁与新品种培育开拓新途径。【方法】早春从不同单株采集鳞芽外植体，置于 WPM +6-BA 0.5 mg·L －1+ GA30.2 mg·L －1培养基中离体培养，根据启动诱导率及增殖系数，筛选适宜离体培养的单株，并对最优单株展开深入研究；在增殖阶段，采用单因子和随机区组试验设计，研究 WPM 培养基中 Ca(NO3)2浓度和植物生长调节剂(PGRs)(6-BA，GA3，NAA，KT 及TDZ)配比对增殖的影响，获得最佳增殖培养基及其 PGRs组合；在诱导生根阶段，采用单因子试验设计，研究冷处理时间和 IBA浓度对生根率及生根质量的影响，获得最佳生根培养方案；根据生根质量划分生根苗等级，并观察移栽成活率。【结果】1)凤丹牡丹启动培养存在基因型差别，供试的17个高结实单株中有7个诱导率≥50%、增殖系数≥2.50，适宜进行离体培养，其中单株 FD10表现最佳(诱导率100%、增殖系数4.58)，被用于研究建立离体快繁技术体系；2)对培养基中 Ca2+浓度与 PGRs对增殖影响的研究结果表明，最佳增殖培养基及其 PGRs 组合为WPM[Ca(NO3)21544 mg·L －1]+6-BA 0.5 mg·L －1+ GA30.2 mg·L －1，以40天为继代周期，增殖系数为3.87，共继代6次；3)对冷处理天数与 IBA浓度对生根影响的研究表明，无根苗先在根诱导培养基(1/2 MS + IBA 2.0 mg· L －1+腐胺1.0 mg·L －1)上培养30天(其中前8天进行4℃冷处理)，再转入生根培养基[1/2 MS(CaCl2加倍)+活性炭4.0 g·L －1]培养20天后生根率达56.67%；4)把生根苗按生根质量分为1～3级，其中1级苗占比84%，2级和3级苗占比分别为12.5%和3.5%，移栽至基质泥炭土+蛭石+珍珠岩(体积比1∶1∶1)中，60天后发现愈伤组织少的1级苗成活率达66.67%，而愈伤组织发达的2级和3级苗则死亡，表明生根质量对移栽成活至关重要。【结论】凤丹牡丹离体快繁技术必须建立在基因型选择的基础上，本研究初步建立优株 FD10的离体快繁技术体系，确定其最佳增殖培养基为 WPM[Ca( NO3)21544 mg·L －1]+6-BA 0.5 mg·L －1+GA30.2 mg·L －1；最佳生根培养方案为1/2 MS +IBA 2.0 mg·L －1+腐胺1.0 mg·L －1，诱导初期冷处理8天；1级生根苗移栽60天后成活率达66.67%。