降钙素基因相关肽对高糖下新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

来源 :中华麻醉学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinhao03
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目的 评价降钙素基因相关肽(CGRP)对高糖下新生大鼠心肌细胞缺氧复氧(A/R)损伤的影响.方法 取原代培养的出生1 ~3 d SD大鼠心肌细胞,在含有10%胎牛血清培养基中培养,细胞接种于6孔细胞培养板,接种密度10×105/ml,3 ml/孔,采用随机数字表法,将其分为5组(n=9),正常糖浓度对照组(NG组)用正常糖浓度(葡萄糖5.5 mmol/L)培养基孵育细胞72 h;高糖对照组(HG组)用高糖(葡萄糖25.0 mmol/L)培养基孵育细胞72 h;HG+ A/R组用高糖培养基孵育细胞72 h后,行缺氧3h,复氧2h;HG+ A/R+ CGRP组用高糖培养基孵育细胞72 h后加入CGRP(终浓度为10-8 mol/L),1h后行缺氧3h,复氧2h;HG+ MR+ CGRP+ CGRP8-37组用高糖培养基孵育细胞72 h后加入CGRP(终浓度为10-8 mol/L)和CGRP8-37(CGRP受体拮抗剂,终浓度10-7 mol/L),1h后行缺氧3h,复氧2h.处理后收集细胞,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI).于缺氧3h和复氧2h时分别收集细胞培养液,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果 与NG组比较,HG组AI、细胞培养液LDH活性升高(P<0.01);与HG组比较,HG+ A/R组AI、细胞培养液LDH活性升高(P<0.01);与HG+ A/R组比较,HG+ A/R+ CGRP组AI、细胞培养液LDH活性降低(P<0.01),HG+ A/R+ CGRP+CGRP8-37组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与HG+ A/R+ CGRP组比较,HG+ A/R+ CGRP+ CGRP8-37组AI、细胞培养液LDH活性升高(P<0.01).结论 CGRP可通过与CGRP受体结合减轻高糖下新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤。

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