【摘 要】
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目的:探讨双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)与氟他胺(flutamide,Flu)对Mafb基因表达的影响。方法:利用原代培养的正常儿童包皮成纤维细胞株,分别采取不同浓度DHT与Flu干预,通过
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上资助项目(编号:81370782);重庆医科大学附属儿童医院临床研究资助项目(编号:lcyj2015-5)
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目的:探讨双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)与氟他胺(flutamide,Flu)对Mafb基因表达的影响。方法:利用原代培养的正常儿童包皮成纤维细胞株,分别采取不同浓度DHT与Flu干预,通过RT-PCR、免疫细胞荧光和Western blot检测Mafb的转录表达情况。结果:在DHT浓度为3.0×10-8mol/L与3.0×10-6mol/L干预条件下,Mafb mRNA的表达量分别为0.372±0.003、0.594±0.045,与正常组(0.444±0.007)相比,DHT 3.0×10-6mol/L组明显上调(P=0.005),而DHT 3.0×10-8mol/L组上调差异不明显(P=0.145);Flu 15μmol/L干预条件下,Mafb mRNA的表达量为0.221±0.013,与正常组相比,表达量明显下降(P=0.000)。细胞免疫荧光分析表明,与正常对照组相比(0.027±0.006),DHT 3.0×10-8mol/L组(0.046±0.004)、3.0×10-6mol/L组(0.076±0.003)Mafb表达量明显上调(P=0.010,P=0.000),而Flu组(0.006±0.002)明显下调(P=0.009)。同样Western blot结果显示,较对照组蛋白水平(0.163±0.001)相比,DHT 3.0×10-8mol/L组(0.146±0.001)上调无统计学差异(P=0.960),DHT 3.0×10-6mol/L组(0.598±0.087)Mafb表达量上调差异有统计学意义(P=0.000),而Flu组(0.066±0.002)明显下调(P=0.040)。结论:在体外培养包皮成纤维细胞株中,Mafb基因的表达受DHT和Flu的调控。Mafb作为雄激素受体下游调控蛋白,可能是雄激素受体信号通路促进尿道发育的重要机制。
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