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【目的】将转化了小胸鳖甲抗冻蛋白基因的棉花内生菌回接棉花，检测转化菌在棉花的定殖及棉花的耐寒性，探索利用内生菌携带外源抗冻基因快速有效提高棉花耐寒性的方法。【方法】利用穿梭载体PBE2构建抗冻蛋白-绿色荧光蛋白转基因质粒；将重组质粒电转至内生菌，然后将转化菌回接棉花进行荧光检测；低温-1℃处理棉花后测定叶片电导率。【结果】重组质粒pBE2-Mpafp149-gfp转化内生菌M17可显著提高其抗冻性。转化的内生菌回接棉花后，在-1℃处理14 h的叶片相对电导率显著低于对照棉花，表明抗冻蛋白对棉花有一定的抗冻