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目的探讨克隆副溶血性弧菌(Vp)耐热直接溶血毒素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因,双酶切载体pUC19和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌JM109.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-90基因组DNA的PCR产物长约600bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与Genebank中的序列有99.65%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性