【摘 要】
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目的:对筛选得到的漆酶高产菌株进行鉴定和产酶条件优化,以提高漆酶活力。方法:采用愈创木酚-PDA和RB亮蓝-PDA平板初筛,得到1株产漆酶能力较强的菌株HYB07,对其进行18S rDNA
【机 构】
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福州大学生物科学与工程学院; 酶高效表达国家工程实验室;
【基金项目】
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福建省发改委生物产业技术开发专项资助;2013年海洋公益性行业科研专项资助(201305015)
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目的:对筛选得到的漆酶高产菌株进行鉴定和产酶条件优化,以提高漆酶活力。方法:采用愈创木酚-PDA和RB亮蓝-PDA平板初筛,得到1株产漆酶能力较强的菌株HYB07,对其进行18S rDNA序列分析,并结合菌丝和菌落形态观察,鉴定HYB07为一色齿毛菌(Cerrena unicolor)。以高氮低碳高无机盐培养基(LM3)为基础培养基,对其中的碳源、氮源、诱导物和培养基初始pH值进行优化,并研究其发酵产酶条件(接种量、发酵温度、转速、装液量),得到HYB07菌株的最佳产酶条件是:葡萄糖2%,酒石酸铵1.5%(ABTS 0.05 mmol/L,培养基初始pH 5.0,接种量8%(体积分数),温度25℃,转速200 r/min,装液量60 mL/250 mL,发酵时间6 d。结论:在上述条件下发酵,漆酶最高活力达79 733 U/L,比采用LM3培养基(56 356 U/L)提高了41.5%。Cu2+对漆酶的合成影响显著,缺乏Cu2+时,漆酶活力下降了87.64%。
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