【摘 要】
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目的建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设
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目的建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标。结果线性范围为5.0×103~5.0×109copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%~8.71%,批间CV为1.52%~12.38%。食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18S rRNA浓度的对数比值(x-±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P<0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调。结论RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性。
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