【摘 要】
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通过构建尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因（upp）敲除打靶质粒，采用同源重组的方法获得了生酮古龙酸杆菌（Ketogulonigeniumvulgare）的upp基因缺失突变株K.vulgareΔupp，可作为基因组无痕修
【机 构】
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河北科技大学生物科学与工程学院,威斯康星大学农业与生命学院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA022102)
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通过构建尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因（upp）敲除打靶质粒，采用同源重组的方法获得了生酮古龙酸杆菌（Ketogulonigeniumvulgare）的upp基因缺失突变株K.vulgareΔupp，可作为基因组无痕修饰系统底盘细胞的upp基因表达载体，转化突变株K.vulgareΔupp，获得upp基因回补菌株PBB-upp，并验证了upp作为负向筛选标记的可行性。实验结果表明：突变株Δupp在1mg/mL的5-氟尿嘧啶培养基上可生长，野生型和回补菌株PBB-upp不能生长，3株菌对5-氟尿嘧啶的抗性存在显著
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