重组人干细胞因子在昆虫细胞中的高效表达

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含信号肽的可溶性人干细胞因子(hSCF)cDNA基因重组于杆状病毒转移载体pVL941中,重组转移载体pVL941-SCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)DNA共转染草地夜蛾细胞Sf9后,通过体内同源重组构建了重组病毒AcNPV-SCF.Southern杂交表明重组病毒基因组中含有hSCF基因片段.重组病毒感染单层Sf9细胞后,表达产物分泌到胞外培养液中.用MTT比色法和TF-1细胞株测定表达产物与IL-3的协同效应,测得感染重组病毒的培养细胞第三天表达量为1970units/mL培养液.Westem-bloting分析可见分子量为18×103、20×103和22×103三条带.
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