【摘 要】
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目的 转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞(HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶-1(HO-1)保护细胞凋亡的作用。方法 将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达:用CCLR破碎细胞后,SDS-PAGE鉴定
【机 构】
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上海交通大学生命科学技术学院,上海第二医科大学附属瑞会医院儿内科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.30170988)、上海市教委资助项目(No.03BZ04)、上海交大-二医大合作基金资助项目
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目的 转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞(HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶-1(HO-1)保护细胞凋亡的作用。方法 将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达:用CCLR破碎细胞后,SDS-PAGE鉴定表达量,采用TNF-α诱导细胞凋亡,以流式细胞仪测定细胞的凋亡率;采用Hemin和SnPP,分别刺激细胞,促进和抑制HO-l在细胞中的表达。结果 经Hemin处理后细胞的凋亡率均在20%以下,而SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升,最高可达到95%以上。实验数据显示HO-1基因表达被抑制时细胞凋亡率
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