【摘 要】
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目的 探讨蛋白激酶N1(PKN1)在胶质瘤组织中的表达变化及其对胶质瘤细胞生物学行为的影响.方法 检索GEPIA数据库验证PKN1基因表达情况,Western blotting法检测胶质瘤细胞系LN2
【机 构】
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300052 天津医科大学总医院神经病学研究所神经肿瘤实验室;300350 天津市环湖医院神经外科
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目的 探讨蛋白激酶N1(PKN1)在胶质瘤组织中的表达变化及其对胶质瘤细胞生物学行为的影响.方法 检索GEPIA数据库验证PKN1基因表达情况,Western blotting法检测胶质瘤细胞系LN229、U87和A172的PKN1蛋白表达量.采用无意义序列(siRNA-NC组)和PKN1小干扰RNA序列(siRNA-PKN1组)转染A172细胞,并通过CCK-8实验、流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验检测肿瘤细胞增殖能力、凋亡率、迁移能力和侵袭能力.结果 经检索GEPIA数据库发现胶质母细胞瘤组织(163例)PKN1 mRNA表达量高于正常脑组织(207例,P＜0.05).Western blotting检测显示,A172细胞PKN1蛋白相对表达量高于U87细胞(t=3.096,P=0.036)和LN229细胞(t=8.994,P=0.000).敲低PKN1基因表达第3～6天siRNA-PKN1组A172细胞增殖能力低于siRNA-NC组(t=3.275,P=0.031;t=5.949,P=0.004;t=10.430,P=0.000;t=6.645,P=0.003);两组A172细胞划痕愈合率随时间推移具有不同程度增加(F=249.993,P=0.000),敲低PKN1基因表达后,A172细胞划痕愈合率(F=97.811,P=0.000)和细胞穿膜数目(t=5.840,P=0.004)均低于siRNA-NC组,而A172细胞凋亡率高于siRNA-NC组(t=5.461,P=0.006).结论 胶质瘤PKN1 mRNA表达量高于正常脑组织,敲低PKN1基因表达可抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,同时诱导肿瘤细胞凋亡.
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