论文部分内容阅读
【摘 要】为确认青稞β-葡聚糖及其产品的生理保健功能，对以青稞β-葡聚糖为主要成分的“青之元?青稞银杏胶囊”进行了严格的动物实验和人体试食实验。动物实验中，用1.400g/kg.bw剂量的受检样品给大鼠灌胃30天，可使其血清总胆固醇（TC）和总甘油三酯（TG）分别下降24.84%和26.67%，与对照组相比达到显著性水平（P <0.05）；人体试验中，服用受试物45天后，受试者的CHOL、TG与试食前比较分别下降10.42%、22.44%，与对照组相比亦达到差异显著性（P<0.05），并无不良反映；而两实验试食后试食组HDL-C与对照组比较差异则无显著性（P>0.05）。此结果证实该产品对动物和人体均有突出辅助降血脂的作用，间接证实了青稞提取物即β-葡聚糖的降血脂、胆固醇作用。
【关键词】青之元?青稞银杏胶囊； β-葡聚糖； 降血脂； 胆固醇； 动物，人体实验
【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）10—0029—02
青稞是青藏高原普遍种植的裸大麦，蓝天碧水的纯净生长环境，不但使其成为真正意义上的绿色食物，而且特殊的气候生态条件使西藏青稞的大多数品种的β-葡萄糖含量远远高于低海拔地区的普通皮大麦；而作为膳食纤维主要组分的谷物β-葡聚糖，其对人体的排毒减肥、增加胃动力、降血脂胆固醇、调剂血糖、预防癌症和心血管类疾术人员率先从高β-葡聚糖含量青稞品种选育入手，相继开展青稞β-葡聚糖提取利用技术与产品开发，先后培育出β-葡聚糖高达8.62%的藏青25品种（藏种审证字2001130号），取得国内第一项从青稞中提取β-葡聚糖技术的国家发明专利（ZL200410053740.8），同时与西藏圣伯力生物技术有限公司合作以青稞提取物为主成分、开发出第一个以β-葡聚糖为标志性成分的国家保健食品“青之元?青稞银杏胶囊”（国食健字G20100106）并开始产业化开发。本实验作为该产品报批检测的必需内容，以期通过进行系统、规范的动物饲喂和人体试食实验，确认产品的辅助降血脂效果，进而研究青稞β-葡聚糖的生理功效，为高原青稞保健产业发展提供更多理论技术依据。
术人员率先从高β-葡聚糖含量青稞品种选育入手，相继开展青稞β-葡聚糖提取利用技术与产品开发，先后培育出β-葡聚糖高达8.62%的藏青25品种（藏种审证字2001130号），取得国内第一项从青稞中提取β-葡聚糖技术的国家发明专利（ZL200410053740.8），同时与西藏圣伯力生物技术有限公司合作以青稞提取物为主成分、开发出第一个以β-葡聚糖为标志性成分的国家保健食品“青之元?青稞银杏胶囊” （国食健字G20100106）并开始产业化开发。本实验作为该产品报批检测的必需内容，以期通过进行系统、规范的动物饲喂和人体试食实验，确认产品的辅助降血脂效果，進而研究青稞β-葡聚糖的生理功效，为高原青稞保健产业发展提供更多理论技术依据。
动物实验部分
1 材料和方法
1.1 实验样品：由西藏圣伯力生物技术有限公司提供批量生产的“青之元?青稞银杏胶囊”4kg，取胶囊内容物（土黄色粉末），常温保存备用。该产品原名“雪芝康胶囊”，在完成包括本实验在内的一系列检测检验后报批注册时，国家食品药品监督管理局根据其成分配方核定改为“青稞银杏胶囊”。产品配方包括青稞提取物（β-葡聚糖）、银杏提取物、淀粉、硬脂酸镁等四种成分，标志性成分为每100g含粗多糖（以葡聚糖计）16g，总黄酮1.1g；人体口服推荐剂量为0.35g/粒×4粒/次×2次/天，以每人60kg体重计算，折合剂量0.047g/kg/天。
1.2 实验动物及实验条件：河南省实验动物中心（实验动物生产许可证号为SCXK（豫）2005-0001）提供的清洁级雄性SD大鼠40只，体重150.3±8.8g。基础饲料由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，生产许可证号为SCXK（湘）2006-0001。实验条件为屏障系统，实验期间环境温度为22℃～24℃，湿度52%～58%，实验动物使用许可证号为SYXK（湘）2003-0002。
1.3 剂量选择：试验分四组：高脂对照级和低、中高剂量组。设低、中、高剂量分别为0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw（分别相当于人体推荐量的5、10、30倍），试验时分别取“青之元?青稞银杏胶囊”内容物4.67g、9.33g、28.00g加蒸馏水至200ml，配制成相应浓度的受试液，按1.0ml/100g.bw体积给大鼠灌胃，每日一次，连续30天。对照组灌胃给予等体积蒸馏水。
1.4 主要仪器与试剂：OLYMPUS AU400全自动生化分析仪；胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）试剂盒由宁波美康生物科技有限公司提供。
1.5 高脂饲料：基础饲料78.8%。胆固醇1%，蛋黄粉10%，猪油10%，胆盐0.2%。
1.6 实验方法：以基础饲料喂饲大鼠一周后，禁食16小时，取尾血，用OLYMPUS AU400全自动生化分析仪测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），根据TC水平兼顾TG将动物随机分为4组：高脂对照组和三个受试物组。自正式试验开始，各组动物换用高脂饲料，受试物组按上述剂量设计灌胃给予不同剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”，高级对照组灌胃给予同体积的蒸馏水，连续30天后，禁食16小时，拔眼球采血测定各项血脂指标。
1.7 数据处理：用Excel2003、Spss11.0软件进行数据转化和统计分析。用Spss11.0软件进行统计分析时，先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane’sT2检验进行两两比较。试验前后血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇比较采用配对比较的t检验。 1.8 结果判定
1.8.1 辅助降血脂功能结果判定：在血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇检测中，血清总胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，可判定该受试样品辅助降血脂功能动物实验结果阳性。
1.8.2 辅助降低甘油三酯结果判定：①甘油三酯二个剂量组结果阳性，②甘油三酯一个剂量组结果阳性，同時高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，判定该受试样品辅助降低甘油三酯动物实验结果阳性。
1.8.3 辅助降低血清总胆固醇结果判定：①血清总胆固醇二个剂量组结果阳性；②血清总胆固醇一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，可判定该受试样品辅助降低血清总胆固醇动物实验结果阳性。
2 结果分析
2.1 青之元?雪芝康胶囊对大鼠体重的影响
试验期间各组动物生长正常。各剂量组动物初始体重、中期体重、终末体重及增重与高脂对照组比较，无显著性差异（P>0.05，表1）。
2.2 对大鼠血清TC、TG、HDL-C的影响
方差齐性检验示各组动物试验前后血清TC、TG、HDL-C方差齐，配对t检验显示高脂对照组动物试验后血清TC、TG显著高于试验前（均P=0.000），提示造模成功。以不同剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”给大鼠灌胃30天，与高脂对照组相比，1.400g/kg.bw剂量可显著降低饲高脂饲料大鼠血清TC、TG水平（P<0.05）（表2、3）；0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw剂量组血清TC分别下降6.52%、9.63%和24.84%（表2），TG分别下降2.22%、15.56%和26.67%（表3）。样品对血清HDL-C水平无显著影响（P>0.05）（表4）。
3 小结
在本实验室条件下，以0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”给大鼠灌胃30天，与高脂对照组比较，1.400g/kg.bw剂量可显著降低高脂饲料大鼠血清TC、TG水平（P <0.05），各剂量对大鼠血清HDL-C水平无显著影响（P>0.05）。根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中辅助降血脂功能动物试验的判定标准，提示在本实验条件下，“青之元?青稞银杏胶囊”对动物具有辅助降低血脂功能。
人体实验部分
1 材料和方法
1.1 实验样品：由西藏圣伯力生物技术有限公司提供外观、口味基本相同的两种胶囊产品，其中一种为待检测的“青之元○R青稞银杏胶囊”，另一种为安慰剂。人体口服推荐剂量为每日2次，每次4粒。
1.2 受试者选择
1.2.1 纳入标准：受试者性别不限，年龄18-65岁。半年内采血两次，两次总胆固醇均≥5.2mmol/L或甘油三酯≥1.65mmol/L，单纯血脂异常，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，自愿受试保证配合。
1.2.2 受试者排除标准：妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者；合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响对结果判断者；不符合纳入标准，未按规定使用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判定者。
1.3 实验设计与分组：采用自身和组间两种对照设计。按受试者血脂水平随机分为“青之元○R青稞银杏胶囊”试食组和安慰剂对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、饮食等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。按双盲法进行试食试验。
1.4 试验方法：受试者于2008年11月12日开始，每天按推荐剂量服用样品，连续服用45天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食；各项观察指标于试食试验开始及结束时各测定一次。
2 观察指标与结果判定
2.1 安全性指标包括以下七类。
2.1.1 一般体格检查：试验前详细询问并了解受试者的精神、睡眠、饮食、大小便等情况，测量试验前后体重、血压、心率变化。
2.1.2 血常规：红细胞计数、白细胞计数及分类、血红蛋白含量测定等。
2.1.3 尿常规：PH值、白细胞、尿糖等。
2.1.4 大便常规。
2.1.5 腹部B超、心电图、X线胸部透视检查（试验开始前测定一次）。
2.1.6 血生化指标检查：血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（GLU）等测定。
2.1.7 不良反应观察。
2.2 功效指标：包括胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）等三项。
2.3 结果判定
2.3.1 CHOL降低>10%；TG降低>15%；HDL-C上升>0.104mmol/L；各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性；
2.3.2 血清胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降血脂功能作用，血清胆固醇、甘油三酯二项指标中一项阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降低血清胆固醇或辅助降低甘油三酯作用。
2.4 统计学处理：结果用均数±标准差表示，自身配对资料采用配对t检验，试验组和对照组之间在方差齐的前提下，均数比较采用成组t检验，否则进行变量转化，满足方差齐后采用t检验，如果方差仍然不齐，采用秩和检验。
3. 实验结果
双盲法观察结束揭晓：服用2号者为“青之元?青稞银杏胶囊”，服用1号者为安慰剂。 3.1 安全性观察
3.1.1 一般情况：试食组51例，对照组51例。经过45天试验后，试验组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除，对照组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除。最后有效试验人群试验组51例，对照组51例。试食前后，受试者精神、睡眠、饮食、大小便状况未见异常；试食组：男/女为35/16，年龄为41.12±8.15岁；对照组：男/女为31/20，年龄为41.75±8.39岁。
3.1.2 腹部B超、心电图、X线胸部透视检测：均在正常范围。
3.1.3 体重、血压、心率、尿常规、大便常规、血常规指标变化情况见表1。试食样品前、后试食组及对照组体重、血压、心率、尿常规、大便常规及血常规均未见明显异常变化。
3.1.4 试食试验前后血生化指标变化情况见表2。试食样品前、后试食组及对照组血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（CR）、血糖（GLU）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）均未见明显异常变化。
3.1.5 试食期间未见明显不良反应。
3.2 功效观察：胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）等三项功效指标观测结果列于表3、4、5。半年内采血两次，分别为试食前1和试食前2血脂数据，以日期靠近服用受试样品的试食前2血脂水平进行分组及统计处理。试验前对照组和试食组血清CHOL、TG水平比较，差异无显著性（P>0.05），提示两组之间具有可比性。试食组试食后CHOL、TG与试食前及对照组试食后比较，差异均有显著性（P<0.05）。试食前后HDL-C水平未见明显改变（P>0.05）。
4 小结
采用自身对照及组间对照法，选择符合试验条件和自愿受试者服用受试物45天后，结果表明：服用“青之元○R青稞银杏胶囊”试验组试食后CHOL、TG与试食前比较，差异有显著性（P<0.05），且试食后CHOL、TG与试食前比较分别下降10.42%、22.44%；试食后试食组CHOL、TG与对照组比较，差异有显著性（P<0.05）；试食后试食组HDL-C与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。试食期间未见明显不良反应。根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）评价标准，提示受试样品具有辅助降血脂功能作用。
讨论
上世纪八十年代后期，美国资深谷物化学家、前Montana州立大学植物学系教授Newman夫妇研究肯定了大麦β—葡聚糖成份具有突出的降解胆固醇、预防结肠癌与糖尿病等作用，同时指出在高海拔地区种植生长的裸大麦品种的β—葡聚糖含量要远远高于低海拔地方种植的普通皮大麦品种，而一般啤酒原料与饲料大麦品质要求严格控制的β—葡聚糖成分，则成为裸大麦的保健利用的品质优势。同时，来源于西藏自治区卫生防疫和有关医疗机构的信息也证实，在日常饮食结构中食用糌粑等青稞食品较多的人群的高胆固醇类疾病发病率相对较低，而中、藏传统医学中对大麦食品特别是糌粑的防治糖尿病的作用一直持肯定态度。这些实例虽然与Newman教授等的研究结论完全一致，但因多停留一般的感性认识、缺乏系统定量研究支持，成为青稞产业尤其是β-葡聚糖医药保健产品、市场开发的主要限制。另一方面，在我们研发过程中，很多志愿者多次试用实验中间产品的通便、减肥、降血脂功效明显，但受制于国内目前的青稞β-葡聚糖提取技术尚不完善、提取产品纯度达不到单成分天然产物定性研究要求，难以直接研究确认青稞β-葡聚糖的降低血脂胆固醇等生理功能。本实验通过开发以青稞β-葡聚糖为主成分的保健产品并进行系统的规范的动物和人体实验，在确认“青之元○R青稞银杏胶囊”辅助降血脂的功效同时，也可间接证实青稞β-葡聚糖的生理作用，既为其未来的功能定位研究提供佐证，同时支持青稞精深加工产业的发展。
参考文献：
[1] 洛桑旦达，强小林.青稞特有营养成分分析与开发利用现状调查研究报告（J）.西藏科技，2001，8（100）：56-60
[2] 曾宇.青稞中-葡聚糖的水法提取及性质分析（J）.四川大学学报，2003，2（40）：382
[3] 强小林，顿珠次仁，张文会，谭海运，张玉红，魏新虹，次珍，朱睦元，陈建澍，陈正行，申瑞玲，青稞β-葡聚糖生理功效、提取技术及其新产品研发[J]. 西藏科技，2010，（2）：6-9
[4] 陈建澍、潘伟槐、潘建伟等.大麦β-葡聚糖对小鼠血脂水平的影响；大麦科学；2002，（3）23-25.
[5] 熊茉君等.青稞降血脂、减肥的临床观察.医药科技，2005，（5）：45.
[6] 吕远平、熊茉君、贾利蓉等，顷刻特性及在食品中的应用，食品科学，2005（7）266-270
[7] 张磊艺，王学翔，杨景云.银杏叶提取物对高脂血症调脂机制的新探.中国微生态学杂志，2003，15（6）：342-343.
[8] 李传勋等.银杏叶黄酮对高血脂大鼠血脂水平的影响.大连医科大学学报，2001，23（3）：179-180.
[9] 邓杰，罗玫.银杏叶对血脂作用的临床研究.江苏中医，1997，18（4）：44-45.
[10] 陈东方， 张聪恪， 李 立， 王海玉， 张 焱：青稞提取物对大鼠调节血脂作用的实验研究，实用预防医学 2010 年9 月， Vol 17， No. 9，1858-1856。
[11] 陈东方， 张聪恪， 李 立， 王海玉， 张 焱：青稞提取物对高脂血症人群降血脂功能研究，实用预防医学 2011 年3 月， Vol 18， No.3，No。525-527。
[12] Rosemary K.Newman， C.Walter Newman and Hadden Graham， The Hypocholesterolemic Function of Barley β-Glucan， 1989American Association of Cereal Chemists，Inc， Cereal Foods World， Vol.34， No.10：883-886.
[13] R.K.Newman and C.W.Newman， Barley as a Food Grain， Sept 1991American Association of Cereal Chemists，Inc. Cereal Foods World， Vol.36， No.9：800-805.
[14] Kari D Hecker，Mary L Meier，Rosemary K Newman and C Walter Newman， Barley β-Glucan is Effective as a Hypocholesterolaemic Ingredient in Foods， 1998， J Sci Food Agric77：179-183.
[15] Kahlon T S，Chow F I， Hypocholesterolemic effects of oat，rice，and barley dietary fibers and fractions（j）. 1997，Cereal Foods World： 42：86-92
[16] T.S. Kahlon and C.L.Woodruff， In Vitro Binding 0f Bile Acide by Rice Bran， Oat Bran， Barley and β-Glucan Enriched Barley， 2003， Cereal Chemistry， Vol.80， Num.3： 260-263.
作者简介：
强小林（1958— ） ， 男， 研究员，西藏自治区农牧科学院农业所副所长兼西藏青稞研究与发展中心主任和圣伯力生物技术有限公司法人，长期从事青稞育种、生产技术和品质与产后加工研究。
项目来源：
本研究得到“国家现代农业产业技术体系（CARS-05）专项”经费资助。
【关键词】青之元?青稞银杏胶囊； β-葡聚糖； 降血脂； 胆固醇； 动物，人体实验
【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）10—0029—02
青稞是青藏高原普遍种植的裸大麦，蓝天碧水的纯净生长环境，不但使其成为真正意义上的绿色食物，而且特殊的气候生态条件使西藏青稞的大多数品种的β-葡萄糖含量远远高于低海拔地区的普通皮大麦；而作为膳食纤维主要组分的谷物β-葡聚糖，其对人体的排毒减肥、增加胃动力、降血脂胆固醇、调剂血糖、预防癌症和心血管类疾术人员率先从高β-葡聚糖含量青稞品种选育入手，相继开展青稞β-葡聚糖提取利用技术与产品开发，先后培育出β-葡聚糖高达8.62%的藏青25品种（藏种审证字2001130号），取得国内第一项从青稞中提取β-葡聚糖技术的国家发明专利（ZL200410053740.8），同时与西藏圣伯力生物技术有限公司合作以青稞提取物为主成分、开发出第一个以β-葡聚糖为标志性成分的国家保健食品“青之元?青稞银杏胶囊”（国食健字G20100106）并开始产业化开发。本实验作为该产品报批检测的必需内容，以期通过进行系统、规范的动物饲喂和人体试食实验，确认产品的辅助降血脂效果，进而研究青稞β-葡聚糖的生理功效，为高原青稞保健产业发展提供更多理论技术依据。
术人员率先从高β-葡聚糖含量青稞品种选育入手，相继开展青稞β-葡聚糖提取利用技术与产品开发，先后培育出β-葡聚糖高达8.62%的藏青25品种（藏种审证字2001130号），取得国内第一项从青稞中提取β-葡聚糖技术的国家发明专利（ZL200410053740.8），同时与西藏圣伯力生物技术有限公司合作以青稞提取物为主成分、开发出第一个以β-葡聚糖为标志性成分的国家保健食品“青之元?青稞银杏胶囊” （国食健字G20100106）并开始产业化开发。本实验作为该产品报批检测的必需内容，以期通过进行系统、规范的动物饲喂和人体试食实验，确认产品的辅助降血脂效果，進而研究青稞β-葡聚糖的生理功效，为高原青稞保健产业发展提供更多理论技术依据。
动物实验部分
1 材料和方法
1.1 实验样品：由西藏圣伯力生物技术有限公司提供批量生产的“青之元?青稞银杏胶囊”4kg，取胶囊内容物（土黄色粉末），常温保存备用。该产品原名“雪芝康胶囊”，在完成包括本实验在内的一系列检测检验后报批注册时，国家食品药品监督管理局根据其成分配方核定改为“青稞银杏胶囊”。产品配方包括青稞提取物（β-葡聚糖）、银杏提取物、淀粉、硬脂酸镁等四种成分，标志性成分为每100g含粗多糖（以葡聚糖计）16g，总黄酮1.1g；人体口服推荐剂量为0.35g/粒×4粒/次×2次/天，以每人60kg体重计算，折合剂量0.047g/kg/天。
1.2 实验动物及实验条件：河南省实验动物中心（实验动物生产许可证号为SCXK（豫）2005-0001）提供的清洁级雄性SD大鼠40只，体重150.3±8.8g。基础饲料由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，生产许可证号为SCXK（湘）2006-0001。实验条件为屏障系统，实验期间环境温度为22℃～24℃，湿度52%～58%，实验动物使用许可证号为SYXK（湘）2003-0002。
1.3 剂量选择：试验分四组：高脂对照级和低、中高剂量组。设低、中、高剂量分别为0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw（分别相当于人体推荐量的5、10、30倍），试验时分别取“青之元?青稞银杏胶囊”内容物4.67g、9.33g、28.00g加蒸馏水至200ml，配制成相应浓度的受试液，按1.0ml/100g.bw体积给大鼠灌胃，每日一次，连续30天。对照组灌胃给予等体积蒸馏水。
1.4 主要仪器与试剂：OLYMPUS AU400全自动生化分析仪；胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）试剂盒由宁波美康生物科技有限公司提供。
1.5 高脂饲料：基础饲料78.8%。胆固醇1%，蛋黄粉10%，猪油10%，胆盐0.2%。
1.6 实验方法：以基础饲料喂饲大鼠一周后，禁食16小时，取尾血，用OLYMPUS AU400全自动生化分析仪测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），根据TC水平兼顾TG将动物随机分为4组：高脂对照组和三个受试物组。自正式试验开始，各组动物换用高脂饲料，受试物组按上述剂量设计灌胃给予不同剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”，高级对照组灌胃给予同体积的蒸馏水，连续30天后，禁食16小时，拔眼球采血测定各项血脂指标。
1.7 数据处理：用Excel2003、Spss11.0软件进行数据转化和统计分析。用Spss11.0软件进行统计分析时，先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane’sT2检验进行两两比较。试验前后血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇比较采用配对比较的t检验。 1.8 结果判定
1.8.1 辅助降血脂功能结果判定：在血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇检测中，血清总胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，可判定该受试样品辅助降血脂功能动物实验结果阳性。
1.8.2 辅助降低甘油三酯结果判定：①甘油三酯二个剂量组结果阳性，②甘油三酯一个剂量组结果阳性，同時高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，判定该受试样品辅助降低甘油三酯动物实验结果阳性。
1.8.3 辅助降低血清总胆固醇结果判定：①血清总胆固醇二个剂量组结果阳性；②血清总胆固醇一个剂量组结果阳性，同时高密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组，可判定该受试样品辅助降低血清总胆固醇动物实验结果阳性。
2 结果分析
2.1 青之元?雪芝康胶囊对大鼠体重的影响
试验期间各组动物生长正常。各剂量组动物初始体重、中期体重、终末体重及增重与高脂对照组比较，无显著性差异（P>0.05，表1）。
2.2 对大鼠血清TC、TG、HDL-C的影响
方差齐性检验示各组动物试验前后血清TC、TG、HDL-C方差齐，配对t检验显示高脂对照组动物试验后血清TC、TG显著高于试验前（均P=0.000），提示造模成功。以不同剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”给大鼠灌胃30天，与高脂对照组相比，1.400g/kg.bw剂量可显著降低饲高脂饲料大鼠血清TC、TG水平（P<0.05）（表2、3）；0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw剂量组血清TC分别下降6.52%、9.63%和24.84%（表2），TG分别下降2.22%、15.56%和26.67%（表3）。样品对血清HDL-C水平无显著影响（P>0.05）（表4）。
3 小结
在本实验室条件下，以0.233g/kg.bw、0.467g/kg.bw、1.400g/kg.bw剂量的“青之元?青稞银杏胶囊”给大鼠灌胃30天，与高脂对照组比较，1.400g/kg.bw剂量可显著降低高脂饲料大鼠血清TC、TG水平（P <0.05），各剂量对大鼠血清HDL-C水平无显著影响（P>0.05）。根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中辅助降血脂功能动物试验的判定标准，提示在本实验条件下，“青之元?青稞银杏胶囊”对动物具有辅助降低血脂功能。
人体实验部分
1 材料和方法
1.1 实验样品：由西藏圣伯力生物技术有限公司提供外观、口味基本相同的两种胶囊产品，其中一种为待检测的“青之元○R青稞银杏胶囊”，另一种为安慰剂。人体口服推荐剂量为每日2次，每次4粒。
1.2 受试者选择
1.2.1 纳入标准：受试者性别不限，年龄18-65岁。半年内采血两次，两次总胆固醇均≥5.2mmol/L或甘油三酯≥1.65mmol/L，单纯血脂异常，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，自愿受试保证配合。
1.2.2 受试者排除标准：妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者；合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响对结果判断者；不符合纳入标准，未按规定使用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判定者。
1.3 实验设计与分组：采用自身和组间两种对照设计。按受试者血脂水平随机分为“青之元○R青稞银杏胶囊”试食组和安慰剂对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、饮食等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。按双盲法进行试食试验。
1.4 试验方法：受试者于2008年11月12日开始，每天按推荐剂量服用样品，连续服用45天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食；各项观察指标于试食试验开始及结束时各测定一次。
2 观察指标与结果判定
2.1 安全性指标包括以下七类。
2.1.1 一般体格检查：试验前详细询问并了解受试者的精神、睡眠、饮食、大小便等情况，测量试验前后体重、血压、心率变化。
2.1.2 血常规：红细胞计数、白细胞计数及分类、血红蛋白含量测定等。
2.1.3 尿常规：PH值、白细胞、尿糖等。
2.1.4 大便常规。
2.1.5 腹部B超、心电图、X线胸部透视检查（试验开始前测定一次）。
2.1.6 血生化指标检查：血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（GLU）等测定。
2.1.7 不良反应观察。
2.2 功效指标：包括胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）等三项。
2.3 结果判定
2.3.1 CHOL降低>10%；TG降低>15%；HDL-C上升>0.104mmol/L；各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性；
2.3.2 血清胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降血脂功能作用，血清胆固醇、甘油三酯二项指标中一项阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降低血清胆固醇或辅助降低甘油三酯作用。
2.4 统计学处理：结果用均数±标准差表示，自身配对资料采用配对t检验，试验组和对照组之间在方差齐的前提下，均数比较采用成组t检验，否则进行变量转化，满足方差齐后采用t检验，如果方差仍然不齐，采用秩和检验。
3. 实验结果
双盲法观察结束揭晓：服用2号者为“青之元?青稞银杏胶囊”，服用1号者为安慰剂。 3.1 安全性观察
3.1.1 一般情况：试食组51例，对照组51例。经过45天试验后，试验组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除，对照组有0例受试者因间断服用受试品或无法判断效果被筛除。最后有效试验人群试验组51例，对照组51例。试食前后，受试者精神、睡眠、饮食、大小便状况未见异常；试食组：男/女为35/16，年龄为41.12±8.15岁；对照组：男/女为31/20，年龄为41.75±8.39岁。
3.1.2 腹部B超、心电图、X线胸部透视检测：均在正常范围。
3.1.3 体重、血压、心率、尿常规、大便常规、血常规指标变化情况见表1。试食样品前、后试食组及对照组体重、血压、心率、尿常规、大便常规及血常规均未见明显异常变化。
3.1.4 试食试验前后血生化指标变化情况见表2。试食样品前、后试食组及对照组血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（CR）、血糖（GLU）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）均未见明显异常变化。
3.1.5 试食期间未见明显不良反应。
3.2 功效观察：胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）等三项功效指标观测结果列于表3、4、5。半年内采血两次，分别为试食前1和试食前2血脂数据，以日期靠近服用受试样品的试食前2血脂水平进行分组及统计处理。试验前对照组和试食组血清CHOL、TG水平比较，差异无显著性（P>0.05），提示两组之间具有可比性。试食组试食后CHOL、TG与试食前及对照组试食后比较，差异均有显著性（P<0.05）。试食前后HDL-C水平未见明显改变（P>0.05）。
4 小结
采用自身对照及组间对照法，选择符合试验条件和自愿受试者服用受试物45天后，结果表明：服用“青之元○R青稞银杏胶囊”试验组试食后CHOL、TG与试食前比较，差异有显著性（P<0.05），且试食后CHOL、TG与试食前比较分别下降10.42%、22.44%；试食后试食组CHOL、TG与对照组比较，差异有显著性（P<0.05）；试食后试食组HDL-C与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。试食期间未见明显不良反应。根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）评价标准，提示受试样品具有辅助降血脂功能作用。
讨论
上世纪八十年代后期，美国资深谷物化学家、前Montana州立大学植物学系教授Newman夫妇研究肯定了大麦β—葡聚糖成份具有突出的降解胆固醇、预防结肠癌与糖尿病等作用，同时指出在高海拔地区种植生长的裸大麦品种的β—葡聚糖含量要远远高于低海拔地方种植的普通皮大麦品种，而一般啤酒原料与饲料大麦品质要求严格控制的β—葡聚糖成分，则成为裸大麦的保健利用的品质优势。同时，来源于西藏自治区卫生防疫和有关医疗机构的信息也证实，在日常饮食结构中食用糌粑等青稞食品较多的人群的高胆固醇类疾病发病率相对较低，而中、藏传统医学中对大麦食品特别是糌粑的防治糖尿病的作用一直持肯定态度。这些实例虽然与Newman教授等的研究结论完全一致，但因多停留一般的感性认识、缺乏系统定量研究支持，成为青稞产业尤其是β-葡聚糖医药保健产品、市场开发的主要限制。另一方面，在我们研发过程中，很多志愿者多次试用实验中间产品的通便、减肥、降血脂功效明显，但受制于国内目前的青稞β-葡聚糖提取技术尚不完善、提取产品纯度达不到单成分天然产物定性研究要求，难以直接研究确认青稞β-葡聚糖的降低血脂胆固醇等生理功能。本实验通过开发以青稞β-葡聚糖为主成分的保健产品并进行系统的规范的动物和人体实验，在确认“青之元○R青稞银杏胶囊”辅助降血脂的功效同时，也可间接证实青稞β-葡聚糖的生理作用，既为其未来的功能定位研究提供佐证，同时支持青稞精深加工产业的发展。
参考文献：
[1] 洛桑旦达，强小林.青稞特有营养成分分析与开发利用现状调查研究报告（J）.西藏科技，2001，8（100）：56-60
[2] 曾宇.青稞中-葡聚糖的水法提取及性质分析（J）.四川大学学报，2003，2（40）：382
[3] 强小林，顿珠次仁，张文会，谭海运，张玉红，魏新虹，次珍，朱睦元，陈建澍，陈正行，申瑞玲，青稞β-葡聚糖生理功效、提取技术及其新产品研发[J]. 西藏科技，2010，（2）：6-9
[4] 陈建澍、潘伟槐、潘建伟等.大麦β-葡聚糖对小鼠血脂水平的影响；大麦科学；2002，（3）23-25.
[5] 熊茉君等.青稞降血脂、减肥的临床观察.医药科技，2005，（5）：45.
[6] 吕远平、熊茉君、贾利蓉等，顷刻特性及在食品中的应用，食品科学，2005（7）266-270
[7] 张磊艺，王学翔，杨景云.银杏叶提取物对高脂血症调脂机制的新探.中国微生态学杂志，2003，15（6）：342-343.
[8] 李传勋等.银杏叶黄酮对高血脂大鼠血脂水平的影响.大连医科大学学报，2001，23（3）：179-180.
[9] 邓杰，罗玫.银杏叶对血脂作用的临床研究.江苏中医，1997，18（4）：44-45.
[10] 陈东方， 张聪恪， 李 立， 王海玉， 张 焱：青稞提取物对大鼠调节血脂作用的实验研究，实用预防医学 2010 年9 月， Vol 17， No. 9，1858-1856。
[11] 陈东方， 张聪恪， 李 立， 王海玉， 张 焱：青稞提取物对高脂血症人群降血脂功能研究，实用预防医学 2011 年3 月， Vol 18， No.3，No。525-527。
[12] Rosemary K.Newman， C.Walter Newman and Hadden Graham， The Hypocholesterolemic Function of Barley β-Glucan， 1989American Association of Cereal Chemists，Inc， Cereal Foods World， Vol.34， No.10：883-886.
[13] R.K.Newman and C.W.Newman， Barley as a Food Grain， Sept 1991American Association of Cereal Chemists，Inc. Cereal Foods World， Vol.36， No.9：800-805.
[14] Kari D Hecker，Mary L Meier，Rosemary K Newman and C Walter Newman， Barley β-Glucan is Effective as a Hypocholesterolaemic Ingredient in Foods， 1998， J Sci Food Agric77：179-183.
[15] Kahlon T S，Chow F I， Hypocholesterolemic effects of oat，rice，and barley dietary fibers and fractions（j）. 1997，Cereal Foods World： 42：86-92
[16] T.S. Kahlon and C.L.Woodruff， In Vitro Binding 0f Bile Acide by Rice Bran， Oat Bran， Barley and β-Glucan Enriched Barley， 2003， Cereal Chemistry， Vol.80， Num.3： 260-263.
作者简介：
强小林（1958— ） ， 男， 研究员，西藏自治区农牧科学院农业所副所长兼西藏青稞研究与发展中心主任和圣伯力生物技术有限公司法人，长期从事青稞育种、生产技术和品质与产后加工研究。
项目来源：
本研究得到“国家现代农业产业技术体系（CARS-05）专项”经费资助。