【摘 要】
：
目的建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶（mNAP）表达。 方法方法学建立。采集研究对象乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝静脉血，应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体，建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法。运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数（AB/c），间接反映待测细胞mNAP的表达量。观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置
【机 构】
：
222002连云港市第一人民院中心实验室,徐州医学院,222002连云港市第一人民院中心实验室,222002连云港市第一人民院中心实验室,222002连云港市第一人民院中心实验室,222002连云港市
论文部分内容阅读
目的建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶（mNAP）表达。
方法方法学建立。采集研究对象乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝静脉血，应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体，建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法。运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数（AB/c），间接反映待测细胞mNAP的表达量。观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置温度、时间以及血浆中碱性磷酸酶对结果的影响，评价方法精密度。用所建方法检测481名健康人群外周血mNAP表达水平，对数据进行正态性检验，确立临床参考区间。检测84例重症感染和局部感染患者和39例病毒感染患者外周血mNAP表达水平。
结果标本检测前，应用磷酸盐缓冲液洗涤可以有效消除血浆中碱性磷酸酶（ALP）干扰。3种不同抗凝剂采集的标本对mNAP检测结果无影响。标本放置室温或4 ℃ 12 h内对检测结果无影响。精密度实验结果，批内变异系数（CV）2.01%～3.33%，平均CV 2.67%；批间CV 5.80%～6.00%，平均CV 5.90%。健康成年人无论男女，mNAP表达水平均呈非正态分布。男、女中位数（P25，P75）分别为1 758（1 378～2 310） AB/c、1 897（1 369～3 249）AB/c，性别之间差异无统计学意义（U=27 140，P=0.243 8）。以2.5%～97.5%位数作为临床参考区间，结果为920.5～3 493.0 AB/c。细菌感染患者外周血中mNAP表达水平13 532（9 756～16 869）AB/c高于病毒感染患者1 143（536～2 012）AB/c以及健康对照人群1 879（1 399～2 497）AB/c(H=221.5, P<0.01)。
结论应用QuantiBRITETM PE试剂盒来标准化流式细胞仪的设置，可定量分析待测样品荧光强度，进而获得细胞所含荧光素分子数，并计算出每个细胞表达的抗原位点或抗原分子数目，从而达到定量检测的目的。应用流式细胞术检测外周血中mNAP，操作简便、快速、结果准确，mNAP表达对于鉴别细菌、病毒感染具有重要的临床价值。（中华检验医学杂志，2014,37：623-627）
其他文献
循环微粒来源于多种细胞，包括血小板、白细胞、内皮细胞和红细胞。另外，肿瘤细胞也能释放微粒到血液中。微粒的形成是膜磷脂重构和细胞骨架水解的后果。微粒表面的磷脂酰丝氨酸（PS）和组织因子（TF）促进Xase和凝血酶原酶的形成，激活凝血和诱发血栓形成。正常人血液中有一定数量的血小板来源的PS+微粒。血栓性疾病如脓毒症、癌症及心肌梗死时，血液PS+微粒和TF+微粒增多，单核细胞是TF+微粒的主要来源。因此
目的建立能单管同时检测JAK2 V617F突变和外显子12突变的方法。方法以PC-3细胞株DNA为野生型对照，分别以HEL细胞株DNA和含有JAK2外显子12突变的质粒作为JAK2 V617F突变和外显子12突变的阳性对照，采用多重PCR扩增不同DNA片段，并结合高分辨熔解曲线法建立检测JAK2 V617F 和外显子12突变的联合检测体系。同时选取42例真性红细胞增多症患者，分别采用上述方法和常规
目的对酶法检测唾液酸（SA）的检测性能进行评价，并对SA的临床应用进行评估。方法回顾性病例对照研究。检测150名表面健康人血清SA水平，建立参考区间；评估酶法检测SA的准确度、精密度、线性；对240例肿瘤患者按病理类型分组后，比较各肿瘤组血清SA浓度与健康对照组是否存在差异；对于存在差异的肿瘤，进一步收取疾病对照组，通过绘制ROC曲线，评价SA与其他肿瘤标志物的诊断性能。采用t检验、ANOVA方差
目的了解国内实验室凝血因子Ⅷ、Ⅸ检测现状及存在的问题，为实施凝血因子Ⅷ、Ⅸ检测规范化及质量改进提供依据。方法调查性研究。对76家实验室进行问卷调查研究，对54家实验室进行质控物活性检测调查研究。对调查问卷的回报信息进行统计分析，将质控物的检测结果按照检测试剂分为3组后进行分级评价。结果72%（52/72）的实验室检测标本量少于30份/月。各实验室的定标频率不同，33%（24/72）的实验室未在每批
分枝杆菌（Mycobacterium）种类较多，可分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌3类。分枝杆菌的细胞壁含有大量分枝菌酸，染色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌。结核分枝杆菌(M.tuberculosis,MTB)是引起结核病的病原菌，可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为重要的传染病，据WHO报道，每年约有800万新病例发生，约300万人死于该病。近
纤维蛋白相关标志物是纤维蛋白原在形成交联凝块和降解过程中形成的蛋白或片段，其中纤维蛋白(原)降解产物（FDP）在D-二聚体进入临床之前在弥漫性血管内凝血（DIC）的诊断中发挥着重要作用，两者联合应用显著提高了DIC的诊断效率；而D-二聚体继影像学之后成为排查静脉血栓的有效诊断手段。可溶性纤维蛋白单体的研究起步较早，由于被检物各异且难于标准化，未能得到充分应用。由于纤维蛋白相关标志物在时间上反映了从
血凝学实验室的重要工作是为临床鉴定出血及血栓形成提供实验诊断依据。要求实验室一方面建立健全各种血凝学项目，另一方面，还需要检验医师按照一定诊断思路进行实验检查及分析，最后明确出血及血栓形成的原因。首先用常规性筛选试验如凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、纤维蛋白(原)降解产物、D二聚体以及血小板计数及功能进行筛选。根据筛选实验的结果，结合患者的临床情况，选择下一步诊断性实验，最终确定诊
目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者脂蛋白相关的磷脂酶A2酶活性（lipoprotein associated phospholipase A2 , Lp-PLA2）、超敏C反应蛋白（hypersensitive C reactive protein, hs-CRP）、D-二聚体之间的相关性及其临床应用价值。方法采用病例对照研究，选择北京大学人民医院冠心病患者150例，健康对照者130名
B型利钠肽（BNP）和N-末端B型利钠肽原（NT-proBNP）是心力衰竭（HF）诊断和管理最常用的标志物。中间片段心房利钠肽原（MR-proANP）是研究较为深入且广泛应用的新兴标志物。研究显示，MR-proANP可作为急性HF的独立诊断指标，但诊断价值较BNP和NT-proBNP无明显优势；预后价值特别是对慢性心力衰竭的预后判断初步显示出了较BNP和NT-proBNP更好的应用前景，但在心血管
假肥大型肌营养不良（duchenne muscular dystrophy , DMD）是X染色体隐性致死性遗传病，发病率约为1/3 500男性活婴，进行性肌萎缩和肌无力伴小腿腓肠肌假性肥大是其典型的临床特征，主要累及青少年男性，一般在12岁以前丧失站立和行走的能力，最后因心肌和呼吸肌无力而于20岁前死于心力衰竭或呼吸衰竭，严重影响了青少年的健康成长。本病是由于编码抗肌萎缩蛋白（dystrophi