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目的 观察高密度培养软骨细胞生物学性状的变化,为软骨组织工程建立合适的体外培养方法.方法 用酶消化法分离兔关节软骨细胞.高密度单层培养并传代,HE染色、蕃红一O染色观察软骨细胞形态和分泌功能.RT-PCR及免疫组化法观察细胞生物学特征变化.结果 高密度培养时,软骨细胞去分化速度减缓,传5代细胞表型保持良好.结论 高密度培养利于维持软骨细胞生物学特征,原代细胞高密度培养和传代培养后高密度培养是较好的获取大量优良软骨细胞的培养方式.