【摘 要】
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目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N-Acetyl-cysteine, NAC）在百草枯（paraquat, PQ）诱导人非小细胞肺癌细胞（A549细胞）发生上皮间充质细胞转分化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）过程中的保护作用以及机制。方法利用A549细胞暴露于不同浓度的PQ溶液，构建拟肺泡上皮细胞EMT模型。分别于第0，2，4，6天收获细胞。观察NAC干预效
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院急诊医学科 210029,南京医科大学第一附属医院急诊医学科 210029,南京医科大学第一附属医院神经内科 210029,南京医科大学第一附属医院急诊医学科 210029,南
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目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N-Acetyl-cysteine, NAC）在百草枯（paraquat, PQ）诱导人非小细胞肺癌细胞（A549细胞）发生上皮间充质细胞转分化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）过程中的保护作用以及机制。
方法利用A549细胞暴露于不同浓度的PQ溶液，构建拟肺泡上皮细胞EMT模型。分别于第0，2，4，6天收获细胞。观察NAC干预效果时，在PQ暴露前2 h加入10 mmol/L NAC孵育细胞。光镜下观察A549细胞的形态学改变，实时定量PCR（Real-time quantitative PCR, RT-qPCR）和Western-blotting技术检测EMT标记物E-cadherin和α-SMA的表达变化以及TGF-β1的表达水平。
结果30 μmol/L PQ染毒A549细胞4 d后建立EMT模型，与对照组相比，PQ组A549细胞表现出典型的形态学改变，细胞由鹅卵石样的上皮细胞外观特征向纺锤形的间质细胞样外观特征改变。Western-blotting结果表明PQ组的A549细胞的TGF-β1、α-SMA蛋白水平表达明显高于对照组，E-cadherin蛋白水平表达低于对照组（均P<0.05）。10 mmol/L NAC预孵育可以有效逆转PQ暴露引起的上述改变，表现为EMT指标E-cadherin升高而α-SMA下降（均P<0.05），且形态学也发现在应用NAC后，纺锤形的间质细胞样的细胞减少且细胞数量有所增加。
结论通过细胞实验证明，PQ暴露可以引起上皮细胞发生上皮间充质细胞转分化，NAC在此过程中具有细胞保护作用。
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