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以热产硫化氢高温厌氧杆菌菌液为模板，根据Gene Bank中登记的编码结构域Tt APuX21基因序列设计1对特异引物，利用多聚酶链反应技术，扩增出目的基因Tt apux21，并克隆到表达载体pET21a（＋）中。经菌液PCR筛选和DNA测序鉴定，表达载体pET21a（＋）中插入有序列正确的Tt apux21基因，重组质粒命名为pEX21。