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目的 建立利用毛囊干细胞和成纤维细胞进行全层皮肤重建的实验方法。方法 取美容手术切取的头皮组织，K19免疫荧光染色定位毛囊干细胞，消化、分离、体外培养，以胶原-成纤维细胞聚合物为基质，采用气-液界面对第2代毛囊干细胞立体培养14d，建立全层皮肤培养模型，并行组织学及K1免疫荧光染色观察。结果 K19免疫荧光染色定位毛囊干细胞存在于毛囊外根鞘处，与成纤维细胞联合体外气-液界面立体培养14d，获得的皮肤类似物，可见真皮基底膜形成，表皮多层上皮有序、多角形排列，上层细胞出现角化，真皮部成纤维细胞均匀分布于胶原基