【摘 要】
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目的制备检测埃博拉病毒(EBOV)的基因芯片,并探索利用EBOV质粒对其进行初步验证。方法设计20条特异性70mer寡核苷酸探针,点样制备成9×8的芯片阵列。采用phi 29 DNA聚合酶多
【机 构】
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广东出入境检验检疫局技术中心,中山大学公共卫生学院,
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目的制备检测埃博拉病毒(EBOV)的基因芯片,并探索利用EBOV质粒对其进行初步验证。方法设计20条特异性70mer寡核苷酸探针,点样制备成9×8的芯片阵列。采用phi 29 DNA聚合酶多重置换扩增(MDA)和荧光标记PCR技术,将标记好的样本与经过预杂交的芯片杂交、洗脱、扫描、最终进行数据分析。结果埃博拉病毒质粒与芯片上的探针杂交后,经扫描出现特异性的荧光信号,部分信号值已达到饱和,阳性对照有明显的杂交信号,而阴性对照和空白对照则呈弱或无荧光信号。芯片可检测的灵敏度达到104拷贝数。结论本实验表明该芯片具有较高的特异性、灵敏度和重复性,可为埃博拉病毒的检测提供一种有效的方法,为进一步建立埃博拉病毒的高通量筛查和鉴定技术平台提供了实验依据。
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