一株谷氨酰胺合成酶高产菌株的酶学分析及其基因的克隆分析

来源 :湖北大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sk1011
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对谷氨酰胺合成酶菌球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)突变菌株Y3进行分析.其谷氨酰胺合成酶摇瓶发酵单位是原始菌株的2.81倍;最适反应温度为40℃;最适pH为6.5.以突变菌株和原始菌株基因组为模板,通过同源克隆策略,成功地获得了球形节杆菌谷氨酰胺合成酶基因gln片段.通过序列比对,突变菌株gln基因在第409 bp处产生T→C的碱基的突变,该处突变使酪氨酸(Tyr409)被组氨酸(His409)取代,该突变解决了谷氨酰胺合成酶腺苷酰基化问题,保证了其在高浓度铵盐条件下保持酶活
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用二氯甲烷作溶剂,以聚乙二醇(PEG3400)作为可溶性聚合物载体,溴乙酰溴和胺作为连接体,在异硫氰酸苯酯的作用下合成1-苯基-3-丁基-2-硫代海因.该产物产率高,反应过程可用常规