EBV-BHRF1基因阳性与阴性细胞株对3种诱导凋亡因素抵抗性差异的研究

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目的观察EBV┐BHRF1基因阳性(SUNE┐1、Raji和B95┐8)与阴性(K562、YAC)细胞株对3种诱导细胞凋亡(apop┐tosis)因素(无血清培养48小时,43℃作用10分钟或2×10-6mol/L地塞米松作用24小时)的抵抗力差异。方法PCR扩增EBV┐BHRF1基因片段诱导后经电镜及电泳DNA检测细胞凋亡。结果分别从B95┐8、Raji及人低分化鼻咽癌细胞株(SUNE┐1)DNA中扩增出EB病毒的BHRF1全基因片段,而K562、YAC细胞株则不含该基因片段。分别经上述3种方法处理后,前3种细胞株的形态及DNA电泳行为未发生明显改变,而后2种细胞株则出现典型的细胞凋亡特征,即细胞核凝缩,细胞膜及细胞器基本保持完整;DNA电泳出现梯形(Ladder)条带。结论初步揭示BHRF1基因产物在抑制上述因素所诱导的细胞凋亡方面起着重要作用 Objective To investigate the effects of EBV┐BHRF1 gene positive (SUNE┐1, Raji and B95┐8) and negative (K562, YAC) cell lines on three kinds of apoptosis-inducing factors (48 hours without serum and 43°C) The resistance difference was 10 minutes or 2×10-6 mol/L dexamethasone for 24 hours). Methods The EBV/BHRF1 gene fragment was amplified by PCR and apoptosis was detected by electron microscopy and electrophoresis. Results The BHRF1 gene fragment of Epstein-Barr virus was amplified from the DNA of B95┐8, Raji and human poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma cell line (SUNE┐1), while the K562 and YAC cell lines did not contain the gene fragment. After treatment with the above three methods, the morphology and DNA electrophoresis behavior of the first three cell lines did not change significantly, while the latter two cell lines exhibited typical cell apoptosis characteristics, ie, cell nuclei condense, and cell membranes and organelles remained basically intact. ; DNA electrophoresis appeared ladder (Ladder) band. Conclusion It is initially revealed that BHRF1 gene product plays an important role in inhibiting apoptosis induced by the above factors.
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