【摘 要】
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目的 在家兔高动力性肺动脉高压模型上经气管途径转染携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(Ad-HGF),探讨外源HGF基因转染诱导侧支肺血管生成的可行性.方法 1月龄幼兔正中开
【机 构】
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徐州医学院附属医院心胸外科,221002山东大学齐鲁医院心脏外科;
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目的 在家兔高动力性肺动脉高压模型上经气管途径转染携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(Ad-HGF),探讨外源HGF基因转染诱导侧支肺血管生成的可行性.方法 1月龄幼兔正中开胸,行左无名动脉与主肺动脉吻合,通过持续左向右分流,3个月后建立高动力性肺动脉高压模璎.将模型动物随机分为对照组、GFP转染组、单次HGF治疗组和重复HGF治疗组.HGF治疗组(单次或1周后重复)通过气管内滴入的方法转染Ad-HGF.2周后,通过RT-PCR和免疫组织化学检测HGF基因和蛋白表达.分别在基因转染后14 d和30 d通过免疫组织化学榆测肺微血管和小动脉密度.1个月时,肺血管造影观测侧支血管建立情况.结果 气管内滴入Ad-HGF后2周,肺组织RNA提取后凝胶电泳显示有484 bp长的特异性片段出现,免疫组化町检测到肺血管内皮、肺泡上皮细胞内HGF表达.肺组织病理切片观察可见HGF基因治疗组肺血管密度(单次HGF治疗组和重复HGF治疗组)明显高于对照组和GFP转染组,增多的血管以微血管为主,1个月后,肌性肺动脉明显增多.肺血管造影证实HGF基因治疗组侧支血管较对照组和GFP转染组丰富.结论 外源性HGF基因经气管转染,早期(2周内)以诱导肺微血管新生为主,后期(1个月时)可促进肺小动脉生成.
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