【摘 要】
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目的:通过生物信息学模拟合成杀菌/渗透增强蛋白氨基端(BPI N端)优势抗原表位肽,免疫动物获得相应抗血清.方法:利用生物信息学分析BPI N端(1 -199)氨基酸序列的抗原性、亲水
【机 构】
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首都医科大学免疫学系,北京,100069
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目的:通过生物信息学模拟合成杀菌/渗透增强蛋白氨基端(BPI N端)优势抗原表位肽,免疫动物获得相应抗血清.方法:利用生物信息学分析BPI N端(1 -199)氨基酸序列的抗原性、亲水性、可塑性、表面可及性和二级结构等理化特性,据此设计合成TA/IK两条多肽,将其与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联后,免疫家兔获得相应抗血清; 采用间接ELISA法鉴定多肽的抗原性、测定血清抗体效价,Western blot鉴定抗血清特异性.结果:人工合成BPI N端TA/IK两个B细胞表位肽; ELISA检测证实: TA/IK抗原肽能与商品化兔抗人BPI55多克隆抗体结合; 所获TA/IK抗血清效价分别为1: 51 200和1: 25 600; Western blot证实: TA/IK抗血清能与BPI55标准品特异性结合.结论:模拟合成的TA/IK抗原肽确为BPI N端优势抗原表位,相应抗血清可用于BPI N端功能性片段的检测鉴定.
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