目的应用光动力抗菌化学疗法(Photodynamic Therapy,PACT)对3种临床常见耐药菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、多药耐药铜绿假单胞菌(multidrug-resistant Pseudomonsa aeruginosa,MDRP)、产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌(ESBLs+E.coli)的杀菌效果进行比较,并初步探索对菌膜形成的影响。方法应用3种耐药菌确定激光照射的最佳强度和光敏剂甲苯胺蓝(Toluidine blue O,TBO)的最适剂量范围。考察TBOPACT对3种耐药菌在活菌数和杀灭对数值的影响,及3种耐药菌对PACT敏感性的差异,并通过革兰染色和环境扫描电镜观察研究TBO-PACT对MRSA和MDRP生物膜的杀菌效果。结果单纯激光照射对3种耐药菌株的杀伤效果较弱,随着激光强度增加呈现一定的增强。加入TBO后可提高对细菌的杀伤效果(P<0.001)。然而,随TBO浓度增加,3种耐药菌株实验组的杀灭对数值先增后减,在TBO浓度为16.67μg/ml时均达到峰值;3种耐药细菌对PACT的敏感性依次为MRSA>ESBLs+E.coli>MDRP。光镜及电镜下的研究结果提示,PACT可抑制MRSA和MRDP菌膜的形成。结论 PACT对于耐药菌感染是有潜力的治疗方法,未来若用于临床难治性的创伤感染,可减少院内细菌耐药的发生。