苦参总黄酮含量测定方法的优化

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目的优化苦参Sophora flavescens Ait.总黄酮含有量的测定方法。方法分别以80%乙醇、甲醇、乙酸乙酯和文献方法提取苦参,分别采用苦参酮盐酸-镁粉反应、槐属二氢黄酮G盐酸-镁粉反应、苦参酮紫外分光光度、槐属二氢黄酮G紫外分光光度测定总黄酮含有量(以苦参酮和槐属二氢黄酮G为对照),HPLC法同时测定苦参酮、槐属二氢黄酮G、异黄腐醇含有量。以反应时间、镁粉加入量、浓盐酸加入量为影响因素,苦参酮、槐属二氢黄酮G吸光度为评价指标,正交试验优化显色条件。再通过双因素方差分析结合LSD法优化测定方法。结果最佳显色条件为反应时间60 min,镁粉加入量250 mg,浓盐酸加入量3.5 m L。主效应A(4种测定方法)和主效应B(4种提取方法)对总黄酮含有量的影响均有显著性差异(P<0.01)。苦参酮盐酸-镁粉显色法与其他方法相比有显著性差异(P<0.01),并与HPLC法测定结果的相关性最好。同时,乙酸乙酯提取效果明显优于其他3种提取方法 (P<0.001)。结论乙酸乙酯提取苦参后,以苦参酮为对照品的盐酸-镁粉反应更适合测定其总黄酮含有量。
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