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目的:建立同时测定直缘乌头中草乌甲素和滇乌碱两种C19二萜生物碱类化合物含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为0.2%三乙胺水溶液(用磷酸调节pH至3.1±0.1)-乙腈(65:35);流速为1.0ml·min-1;检测波长为260nm;柱温为30℃。结果:草乌甲素和滇乌碱分别在0.0821.632μg和0.0701.392μg范围內呈良好线性关系(r>0.9998);草乌甲素和滇乌碱的平均回收率分别为98.99%,99.49%;RSD分别为1.39%,1.24%(n=6)。结论:该方法简便、准确,分离效果好,可用于直缘乌头中草乌甲素及滇乌碱的含量测定。