缺氧对人脐静脉内皮细胞株增殖与活力的影响

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目的 了解缺氧对人脐静脉内皮细胞增殖与活力的影响.方法 将体外培养的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926分为常氧组和缺氧组.常氧组常规培养,缺氧组细胞充入混合气体(含体积分数94% N2、5% CO2、1% O2)后置于37 ℃缺氧培养1、3、6、12 h.提取两组细胞总蛋白,用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平;以噻唑蓝法检测细胞活力,并用流式细胞仪检测细胞周期.结果 与常氧组比较,缺氧组细胞培养1 h VEGF表达增高,6 h达高峰,12 h降低但仍明显高于常氧组;培养3 h时细胞PCNA蛋白表达开始升高,6 h达峰值并持续至12 h.培养1、3 h,缺氧组细胞活力较常氧组明显增高(P<0.05),6 h开始下降,至12 h时低于常氧组但差异无统计学意义(P>0.05).缺氧组细胞培养1、3、6 h,G0/G1期细胞均较常氧组少,S期和G2/M期细胞增多,增殖指数(PI)各为(43±9)%、(39±11)%、(40±11)%,均高于常氧组(32±9)%,其中3、6 h时差异有统计学意义(P<0.05);12 h时PI为(27±4)%,降至常氧组水平以下(P<0.05).结论 缺氧早期可促进人脐静脉内皮细胞增殖,但随着缺氧时间的延长细胞增殖将受抑制.
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