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目的：采用错配PCR和DNA改组技术制备抗肝癌单链抗体。方法：联合采用错配PCR和DNA改组技术随杌突变抗肝癌单链抗体A4-16重链和轻链可变区，构建抗肝癌噬菌体抗体次级突变库，利用噬菌体展示技术从中筛选出高亲和力单链抗体突变株。结果：抗肝癌噬菌体抗体次级突变库容为4．5×10^7，经过3轮富集筛选和ELISA鉴定获得2株突变株M25、M36，不仅保留原始克隆的特异性，而且相对亲和力指数分别为原始克隆的2倍和2．4倍。结论：错配PCR结合DNA改组技术是提高单链抗体亲和力的一种有效的手段。